《表1 NTG诱变体系:维生素B_(12)生产菌的化学诱变和抗生素抗性筛选》

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《维生素B_(12)生产菌的化学诱变和抗生素抗性筛选》


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在无菌三角瓶中分别按表1加入制备好的菌悬液、NTG母液及Tris缓冲液(其中0#为对照组,1#、2#和3#为实验组),然后将三角瓶于28℃条件下振荡反应30min。反应完毕后将瓶内液体转移至离心管中,10000r/min离心10min,离心结束后倒掉上清液,将沉淀加入Tris缓冲液混匀,重复该离心混匀操作3次以除去残留的NTG,最后加入5mL Tris缓冲液和5mL 50%甘油(V甘油∶V水=1∶1)将菌体重新混匀,得到诱变后的菌悬液。