《表4 实际样本中检测简单异尖线虫复合种Tab.4 Detection of A.simplex species complex from field samples》

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《环介导等温扩增联合横向流动试纸条检测简单异尖线虫/派氏异尖线虫方法的建立》

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注:Asi:简单异尖线虫，Ape:派氏异尖线虫，Had:内弯宫脂线虫，Hfa:费氏宫脂线虫

通过形态学检查，从140条海鱼中共分离出1573条异尖科线虫，其感染率为77.1%。这些虫体包括简单异尖线虫/派氏异尖线虫，内弯宫脂线虫，费氏宫脂线虫和对盲囊属线虫（表4）。由于感染严重的鱼类中可以分离出数十条甚至百余条线虫，逐一鉴别分离的每条虫体费时费力。因此，我们按照以下原则，利用LAMP-LFD和rDNA-ITS1-5.8S-ITS2测序两种方法对进行鉴定:当分离到≤5条异尖线虫/鱼时，所有虫体利用上述两种方法进行鉴定；当分离出≥5条异尖线虫/鱼时，随机选取5条虫体进行鉴定。遵循这一原则，共计287条形态学检查为异尖科的虫体进一步使用上述两种分子生物学方法进行了鉴定。测序结果显示，287条线虫均为异尖线虫科，分别为简单异尖线虫/派氏异尖线虫（266条）、内弯宫脂线虫（15条）、费氏宫脂线虫（5条）以及对盲囊异尖线虫（1条），简单异尖线虫/派氏异尖线虫占总异尖科线虫的92.7%（266/287）。LAMP-LFD结果表明，共计266条鉴定为简单异尖线虫/派氏异尖线虫，与rDNA-ITS1-5.8S-ITS2的测序结果完全一致（表4）。