《表1 引物序列:山东地区肉兔常见病原菌感染流行病学横断面调查及分析》

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《山东地区肉兔常见病原菌感染流行病学横断面调查及分析》


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采集的鼻腔棉拭子样品中分别加入1 m L LB液体培养基,37℃,180 r/min,4 h预增菌,增菌后的菌液作为模板进行病原学PCR检测,分别使用表1中引物进行PCR扩增。按照如下比例配制反应体系:模板1μL,上、下游引物(20 pmol/μL)各0.5μL,2×Taq PCR Mix12.5μL,补充去离子水至25μL。PCR反应条件:94℃5 min;94℃40 s,退火40 s,72℃1 min,35个循环;72℃10 min。PCR结束后,取6μL扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳观察,并用紫外凝胶成像仪拍照。