《表2 引物序列Ⅱ：过表达miRNA-320对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响》

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《过表达miRNA-320对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响》

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提取总蛋白后采用BCA法测定蛋白浓度。取50μg总蛋白进行SDS-PAGE电泳分离蛋白质，电泳后将蛋白转移至硝酸纤维膜上，5%脱脂奶粉封闭1 h，添加PGRMC1及BMP15兔多克隆抗体（1∶1 000稀释），4℃孵育过夜；添加辣根过氧化物酶标记的二抗（1∶5 000稀释），室温下孵育1 h。洗膜后，用凝胶成像分析系统检测条带，Image J软件测定条带灰度值，以β-actin为内参计算PGRMC1及BMP15的蛋白相对表达量。qRT-PCR法参照方法2.4。引物序列Ⅱ见表2。