《表1 脊尾白虾cry1引物序列》

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《脊尾白虾隐花色素基因cry1的克隆及其功能分析》


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以脊尾白虾转录组序列为模板,用Primer premier 5.0软件设计cry1核心序列引物(表1),通过PCR扩增获得cry1核心片段,经纯化、克隆后送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序。根据获得的核心片段设计特异性引物cry1-F-130、cry1-F-35用于5′端的快速扩增,cry1-Z-827、cry1-Z-1 173用于3′端的快速扩增(表1)。PCR反应体系和反应程序按SMARTer RACE 5′/3′Kit(TaKaRa)试剂盒的说明设置。扩增产物经过纯化及克隆测序后,用DNAMAN 8软件进行拼接获得脊尾白虾cry1的完整cDNA序列。