《表3 real-time PCR体系筛选与建立（Ct值）》

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《实时PCR技术在羊亚科肉类鉴定中的应用》

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分别进行引物浓度筛选、探针浓度筛选和退火温度筛选，具体信息见表3。最终确定的real-time PCR方法为：PCR预混液（2×）10μL，5’端、3’端引物（10μmol/L）各0.2μL，探针（10μmol/L)0.1μL，DNA模板（1～100 ng/μL)1μL，用无菌双蒸水补足20μL。PCR扩增程序为：95℃预变性5 min；35?个循环（95℃变性15 s，58℃退火及延伸1 min，收集荧光）。