《表1 预留变形量:FK506对大鼠施万细胞GFAP、NF200及Nogo-A蛋白表达的影响》

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《FK506对大鼠施万细胞GFAP、NF200及Nogo-A蛋白表达的影响》


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收集细胞,根据说明书利用高纯总RNA快速提取试剂盒(Bio Teke)提取细胞的总RNA,并调整RNA含量至3组一致,应用real time-PCR扩增目的基因,三个目的基因的引物如表1,反应体系为SYBR GREEN mastermix 10μL,上、下游引物(10μM)各0.5μL,c DNA模板1μL,用dd H2O补足至20μL。反应条件,预变性(95℃,10min),循环为变性(95℃,10 s)、退火(60℃,20 s)、延长(72℃,30 s),共40个循环,使用荧光定量仪进行检测析。