《表1 磷石膏化学组成:Apelin-13在改善自体动静脉内瘘血管狭窄中的机制》

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《Apelin-13在改善自体动静脉内瘘血管狭窄中的机制》


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参照Genebank数据库中Apelin相关序列,设计出合成的干扰序列shApelin和无义序列Scramb两个序列,见表1,且在pLKO.1的质粒之上进行转染,在转染的前1d,接种约5×105个细胞,然后转至6孔细胞培养板上接受培养,在转染的0.5h前需换用没有血清的DMEM培养液再予以培养。将200μL无血清的DMEM培养液、3μg质粒、9μL ViaFect TM转染试剂充分混合制作成转染液,放在室温环境下静置10min左右。再将这些转染液加入6孔板内,注意轻摇混匀再放置到细胞培养箱内持续培养约9h,待转染完毕之后再换用浓度10%的胎牛血清所制的DMEM培养液中进行继续培养,时间为1d,最后测得两组序列,即Scramb组与shApelin组。