《表2 真江蓠10个微卫星位点的信息》

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《中国黄渤海真江蓠(Agarophyton vermiculophyllum)群体遗传多样性研究》


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我们使用Kollars等[18]和Krueger-Hadfield等[19]开发的10对真江蓠微卫星引物进行片段扩增(表2),引物由北京擎科生物科技有限公司青岛分公司合成。本实验我们采用双重荧光检测,F正向引物的5′端连接荧光基团(FAM或HEX)。PCR扩增反应体系15μL:模板DNA 1.0μL(约15 ng),2*Tsingke Master mix 7.5μL,正向引物和反向引物各1.0μL(10μmol/L),灭菌水4.5μL。PCR反应程序:98℃预变性2 min;98℃变性10 s,56℃退火10 s,72℃延伸10 s,30个循环;最终72℃延伸5 min。PCR扩增产物在3730型遗传分析仪(ABI,USA)上进行毛细管电泳检测(北京擎科生物科技有限公司青岛分公司)。