《表1 8个微卫星位点信息》

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《基于微卫星分子标记的凡纳滨对虾商业苗种遗传多样性分析》


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采用天根海洋动物组织DNA提取试剂盒进行肌肉组织DNA提取,利用紫外分光光度计(BioImaging ystems,UVP)进行DNA浓度测量,并根据测量结果将DNA稀释至50 ng/μl。将稀释得到的DNA利用8个微卫星位点进行PCR扩增。PCR反应体系:总体积为20μl,其中,模板DNA 1.5μl,(Vazyme)2×Taq Master Mix(Dye Plus)10μl,正向和反向引物(10 mmol/L)各0.8μl,灭菌超纯水6.9μl。PCR反应程序:95℃预变性3 min;95℃变性30 s;72℃退火30 s,72℃延伸30 s,共30个循环;72℃延伸5 min;4℃保存。PCR产物微卫星分型于生工生物工程(上海)股份有限公司,利用ABI 3730XL测序仪完成,所用微卫星位点及其引物信息见表1。