《表1 酶标仪检测与液相色谱测定发酵液中维生素K2含量》

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《产维生素K2贝莱斯芽孢杆菌ND的诱变育种及突变子快速筛选》

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如图2(b）所示，以VK2浓度为横坐标，标准品溶液在248nm下吸光度为纵坐标拟合的标准曲线方程为y=0.023 09+7.250 97×10-4 x，R2=0.998 24，由此我们判定分光光度法检测VK2的含量是可行的．提取诱变菌株发酵液中的VK2，分别用HPLC和分光光度法对提取液中的VK2含量进行检测，如图2(c）所示，两种检测方法的测定结果一致性较低，可能发酵液提取物中的杂质干扰了VK2含量检测的准确性；当VK2含量高于30mg/L时，特征吸收波长下的吸收值变大，相对的降低了杂质吸收的干扰，两种测定方法的结果存在很好的相关性（y=27.274 05+3.785 59x，R2=0.993 01）（图2(d））．表1列出了经过随机诱变获得的部分菌株发酵提取液中的VK2含量经HPLC和分光光度法测定的结果．每个样品做4次重复，可以看出VK2含量经分光光度法测定的重复性较好．综合上述实验结果，我们发现虽然分光光度法不能用于对发酵液提取液中的VK2浓度进行定量检测，但是其检测结果与HPLC检测结果的线性关系可以用来辅助筛选高产突变菌株．