《表1 试剂盒的组成：恩诺沙星酶联适配体分析检测试剂盒的研制》

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《恩诺沙星酶联适配体分析检测试剂盒的研制》

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试剂盒组成（96个反应/盒）见表1。使用方法如下:（1）固定DNA:首先向固定磷酸盐缓冲液（PBS）中加入A1 200nmol/L和B1 500nmol/L，于37℃孵育20min形成部分互补的dsDNA。链霉亲和素修饰的酶标板用200μL磷酸盐-吐温缓冲液（PBST）洗涤三次，每次5min。然后在酶标板每孔加入100μL含A1和B1的dsDNA溶液，置于37℃摇床，反应2h。反应完毕移去反应液，凹槽用PBST洗涤三次，保留待用（凹槽1）。用相同的方法在另一链霉亲和素修饰的酶标板的凹槽上固定DNA C1（C1的浓度为300nmol/L），保留待用（凹槽2）。（2）检测ENRX:ENRX用结合缓冲液稀释成不同浓度，加入到待用凹槽1，每口100μL，室温反应30min；反应完毕，用移液器吸出反应液转移到待用凹槽2，37℃摇床反应20min；然后移去反应液，用PBST洗涤三次，每次5 min，每口加100μL anti-FITC-HRP，37℃反应30min，移去反应液，洗涤三次，最后加100μL TMB-H2O2底物显色液，反应20min，加25μL 2mol/L H2SO4终止反应。反应液由蓝变黄，用酶标仪测450nm波长处的吸光度。