《表2 鱼类名录：淫羊藿苷对蛋鸡生产性能、蛋品质、输卵管氧化还原状态和炎性细胞因子基因表达的影响》

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《淫羊藿苷对蛋鸡生产性能、蛋品质、输卵管氧化还原状态和炎性细胞因子基因表达的影响》

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剪取部分输卵管组织样品于研钵中，进行液氮研磨，取约100 mg研磨后样品于1.5 mL Eppendorf管中，并加入1 mL Trizol（湖南艾科瑞生物工程有限公司）提取总RNA。cDNA合成使用AB-ScriptⅡRT Master Mix（武汉爱博泰克生物科技有限公司）。反转录得到的cDNA原液需要稀释15倍使用。用实时荧光定量PCR法测定输卵管组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-2(IL-2）、白细胞介素-4(IL-4）、白细胞介素-6(IL-6）和白细胞介素-10(IL-10）的mRNA相对表达量。PCR使用10μL扩增体系：4.4μL cDNA，5μL SYBR MIX（上海星汉生物科技有限公司），0.3μL上游引物，0.3μL下游引物。反应程序为：95℃预变性3 min，95℃变性10 s，60℃退火10 s，72℃延伸30 s，40个循环，55～95℃，每10 s升0.5℃作熔解曲线。以β-肌动蛋白（β-actin）为内参基因，目的基因的mRNA相对表达量用2-△△Ct法进行计算，每个样品进行3次平行PCR。通过primer 6.0设计引物序列，引物由生工生物工程股份有限公司（武汉合成部）合成，各引物序列见表2。