《表2 液相色谱梯度洗脱程序》

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《饲粮中添加半胱胺螯合锌对肥育猪肉品质和氨基酸组成的影响》

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血清中游离氨基酸含量测定参照Yin等[16]的方法并进行了改进。将200μL血清转移到1.5 mL离心管中，加入8μL D-苯丙氨酸内标（2.5 mmol/L）和800μL甲醇涡旋混匀，然后在4℃以14 000 r/min离心10 min，收集样品的上清液。取400μL上清液在真空浓缩器中蒸干，然后用100μL硼酸盐缓冲液复溶。取10μL复溶后的样品加入50μL硼酸盐缓冲液和20μL衍生试剂，立即涡旋混匀，55℃加热10 min。冷却至室温后，将溶液转移至上机小瓶中使用Waters ACQU-ITY UPLC I-Class型超高效液相色谱仪（沃特世，美国）与Q-Exactive型高分辨率质谱仪（赛默飞，美国）分析。色谱分离采用Waters ACQUITY UP-LC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7μm）（沃特世，美国）加Waters ACQUITY UPLC BEH C18预柱（2.1 mm×5.0 mm，1.7μm）（沃特世，美国），柱温为35℃，进样量为2μL，流速为0.3 mL/min，洗脱梯度程序见表2，全运行时间为15 min。