《表3 TEN法反复多次提取DNA和TEN3法的得率和纯度》

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《天山1号冰川冻土微生物总DNA提取方法的比较和优化》

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为了进一步提高TEN法的DNA提取得率，用TEN法对同一份天山冰川冻土样品进行了反复提取，同时采用改良后的TEN3法提取。TEN3法和反复提取3次后的DNA得率及纯度汇总在表3。同一样品反复通过TEN法进行提取3次获得的DNA（对应TEN、TEN1、TEN2）得率依次为（383±57）、（410±72)ng/g和（61±15)ng/g冻土，而A260/A280逐渐升高，这表明单次提取无法完全获得冻土样品中的所有DNA，反复多次提取同一样品后DNA中的杂质成分逐渐减少。TEN3法参考Zhou法将2次细胞裂解产物合并进行DNA抽提，得率达到（413±91)ng/g冻土，A260/A280和A260/A230分别为（1.76±0.04）和（1.08±0.24）。对所提基因组DNA进行琼脂糖电泳检测结果如图2所示，提取的DNA电泳后均得到较清晰的主条带，相对分子质量接近23×103。但由于冻土土壤中微生物的分布存在着不均一性，而在提取过程中可能又因物理机械剪切的作用而使基因组DNA有不同程度的降解。因此，后续实验选择对TEN3法进行了优化。