《表1 引物信息:山羊肺炎病原菌的分离鉴定及药敏试验》

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《山羊肺炎病原菌的分离鉴定及药敏试验》


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微波炉加热法提取分离菌DNA[15]。采用参考文献[14]所设计的特异性引物对相关病原菌进行PCR鉴定,引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成(表1)。PCR反应体系10μL,其中DNA模板1μL,上、下游引物各0.5μL,Premix Taq 5μL,加无菌水补足至10μL。PCR反应条件:95℃5 min;94℃30s;58℃30s;72℃45s;共35个循环;72℃延伸10min,16℃终止反应。PCR产物用15g/L琼脂糖凝胶电泳观察。