《表1 4种玻璃化液配方:星斑川鲽胚胎的玻璃化冷冻保存》

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《星斑川鲽胚胎的玻璃化冷冻保存》


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糖类的性质不同,其对胚胎的保护与损伤作用均不同。为研究葡萄糖、果糖、蔗糖和海藻糖对胚胎的影响,利用BS2基础液和以上渗透和非渗透性抗冻剂配合不同的糖类,配制浓度为40%的PMG3S、PMG3T、PMG3G和PMG3F四种玻璃化液(表1),室温下采用玻璃化液五步法[11]处理星斑川鲽的尾芽期胚胎30 min(表2)。每组平衡处理星斑川鲽胚胎40粒,不经冷冻直接用浓度为0.125mol·L-1的蔗糖溶液洗脱10 min,然后用吸管吸出胚胎置于14℃无菌海水恒温培养箱中培养,6 h后统计胚胎的成活率,继续培养,每隔3 h换一次水,观察统计孵化率。星斑川鲽同期胚胎作对照,相同环境下培养(n=3)。