《表1 SSR引物信息表:基于表型和SSR标记的金平草果遗传多样性分析》

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《基于表型和SSR标记的金平草果遗传多样性分析》


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5对SSR引物序列选自Yang等[14]的研究结果,引物序列见表1。10μL聚合酶链式反应(PCR)体系包含:1.0μL模板DNA(20ng/μL)、0.8μL SSR引物(0.2μmol/L)、0.8μL dNTPs(2.5mol/L)、1.2μL10×PCR缓冲液(含Mg2+)、0.2μL Taq DNA聚合酶(2.5U/μL)、6μL ddH2O,反应体系所用试剂均购自北京庄盟国际生物基因科技有限公司。所有扩增均在PCR仪上进行。反应程序为95℃预变性5min;95℃30s,55℃~59℃30s,72℃30s,共30个循环;最后72℃延伸10min,4℃保温。扩增产物在8%非变性聚丙烯酰胺凝胶(丙烯酰胺∶甲叉双丙烯酰胺=19∶1)上分离,电泳结束后用1%AgNO3染色,待条带清晰后拍照保存。