《表1 互花米草SaHO1基因克隆及定量分析引物及序列》

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《互花米草SaHO1基因的克隆与功能鉴定》


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下划线部分为酶切位点。

从互花米草三代测序数据库找到SaHO1的cDNA序列,利用DNAMAN软件设计引物(表1),采用高保真聚合酶(Clontech公司)从互花米草cDNA文库中扩增SaHO1基因全长片段,借助In-fusion连接酶(TransGen公司),将克隆回收到的SaHO1基因片段与线性化的pCambia3301载体(Sma I和Spe I位点)进行连接。连接产物转化到大肠杆菌中,过夜生长繁殖。挑取单克隆进行菌落PCR验证、摇菌、提取质粒,送往广州铂尚生物科技有限公司(福州)测序。