《表1 重组蛋白抗原最适包被浓度与血清稀释度的确定》

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《羊传染性胸膜肺炎支原体RPS11基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立》

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从方阵试验结果可以看出，pET28a-RPS11重组蛋白抗原浓度为1.0μg/mL，血清的稀释度为1∶400时，阳性血清的OD450值在1.0左右，且阴性血清的OD450较低，P/N值最高（表1）。因此确定抗原最佳包被浓度为1.0μg/mL，血清最佳稀释度为1∶400。按上述条件继续进行后续条件筛选，根据P/N值的大小明确了血清最佳作用时间为45 min，酶标二抗最佳工作浓度为1∶4000，酶标二抗反应时间为30 min，底物显色为10 min。