《表2 比较两步荧光定量PCR与三步荧光定量PCR方法》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《基于三步荧光定量PCR技术揭示不同产区白酒酿造系统中Lactobacillus sp.的分布特征》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

通用两步荧光定量PCR扩增可能会对长片段扩增产物的扩增效率产生影响。因此，本研究通过10倍比梯度稀释山东潍坊产地芝麻香型白酒酿造系统40 d的酒醅基因组，以稀释102–106倍的样本为荧光定量PCR模板，优化退火和延伸程序，构建稳定准确的反应条件。如表2所示，两步荧光定量PCR扩增结果显示平行之间的Ct值变异系数较大（CV=0.01%-2.65%），扩增稳定性较差；R2=0.40，线性较弱。优化扩增条件：变性98°C10 s，退火55°C 30 s，延伸72°C 25 s，构建三步荧光定量PCR方法。三步荧光定量PCR扩增结果显示平行之间的变异系数均小于1%（CV=0.17%-0.59%），稳定性较高；R2=0.99，线性较强。实验结果表明优化后的荧光定量PCR条件可以明显地提高检测结果的稳定性和准确性，满足在白酒酿造系统中定量Lactobacillus sp.的应用要求。