《表1 引物信息:排酸护肾汤防治尿酸性肾病MAPK通路与尿酸相关靶点的研究》

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《排酸护肾汤防治尿酸性肾病MAPK通路与尿酸相关靶点的研究》


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称取50 mg肾组织加入1 mL Trizol,震荡后置于冰上孵育30 min。加入200μL三氯甲烷摇匀至乳化,12 000g离心15 min后取上清液,加入等体积异丙醇,置于温度约25℃环境下10 min。将所得混合液在4℃下离心10 min,弃其上清液后加入1 mL70%浓度乙醇溶液,后于4℃下离心5 min。弃去乙醇并在25℃环境下将沉淀产物干燥2~5 min,后加入RNA溶解液适量(如20μL)使其溶解,搅拌使其溶解完全,加入反转录引物,经过简单的离心、充分振荡混匀后放入水浴锅中,温度设置为70℃,预变性时间为5 min,然后置于冰上2min。最后的PCR扩增阶段需设置反转录程序,引物信息见表1。