《表2 定量PCR引物：饲粮添加丁酸梭菌对断奶仔猪肠道健康的影响》

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《饲粮添加丁酸梭菌对断奶仔猪肠道健康的影响》

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用tacoTMRNA试剂盒提取断奶仔猪空肠和回肠肠段上皮细胞中总RNA，利用All-in-OneTMFirstcDNA Synthesis试剂盒，按照其说明书步骤分别将空肠和回肠RNA逆转录为cDNA。利用SYBR（10）Premix Ex TaqTM荧光定量试剂盒，按照其说明步骤，以1ulcDNA为模板进行PCR扩增，实时定量PCR样品反应体系采用SYBR Green I，其最终反应体系为15μL，每个基因4个平行。反应条件为Hold stage:95℃10 min；Cycling stage:95℃10 s，61℃20 s；72℃10 s，40 cycles；Melt curve:72℃10 s，95℃10 s。每个样品均设置相应未经逆转录的模板作为阴性对照，同时每个样品均设置相应的内参作为对照，得到各自的荧光阈值循环数（Ct值），采用相对定量法2-ΔΔCt进行计算。定量PCR引物见表2。