《表1 采集时间对樟树未成熟合子胚愈伤组织诱导的影响》

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《樟树胚性愈伤组织诱导与体胚发生研究》

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表中数据为平均值±标准误，同一列中不同小写字母表示差异达到显著水平（P<0.05）；下表同

不同时间采集的樟树未成熟合子胚经离体培养后的诱导情况存在差别（表1、图1）。不同采集时期的合子胚愈伤组织诱导率差异显著，表现出先升高后降低的趋势（P<0.05）。在原胚中后期采集的合子胚接种时为胶状白点，培养7 d后出现发黑现象，培养过程中无法正常生长，难以存活，最后全部死亡（图1a）。在心形胚前期的合子胚诱导率最高，达到了93.33%，与心形胚中后期差异不显著，显著高于原胚中后期和成熟期前期（P<0.05）。心形胚时期的合子胚在培养过程中生长迅速，萌发成白色子叶状胚（两瓣、多瓣），诱导率均在90%以上，诱导获得愈伤组织较多且有簇生次生胚发生（图1b、图1c）。成熟期前期的合子胚趋近成熟，易形成绿色豆状种子，培养一段时间胚发育成纤细的幼苗，少量在子叶周围诱导灰白色愈伤（图1d）。说明胚龄越小，所要求的营养和培养条件也高，培养的难度大；随合子发育成胚，初生胚乳核发育成胚乳，可以提供一定营养成分，在添加外源激素作用下容易发生分化，当幼胚发育球形胚后，胚从异养逐渐为自养，就出现早熟萌发，很难形成胚性愈伤组织。因此，可以确定适用于樟树未成熟合子胚性愈伤组织诱导及产生次生胚的最佳取材时间（7月15日-7月25日）为心形胚时期。