《表1 疾病活动指数(DAI评分)》
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《溃结宁膏穴位敷贴对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织闭合蛋白影响的实验研究》
1)宏观表征观察。观察大鼠一般情况,记录体质量、饮食量等量化指标改变,观察大鼠精神状态、二便状态、毛发毛色等其他表现,并计算疾病活动指数(DAI),具体评分标准见表1。2)Western blotting法检测大鼠结肠Claudin-1、2、8蛋白的表达。蛋白样品制备:培养瓶加入适量PBS,洗涤细胞,10μL PMSF,摇匀置于冰上,加100~500μL含PMSF的裂解液,4℃下3 000 r/min离心15 min,离心后取组织上清液,置于-80℃保存。蛋白定量测定:去离子水融解蛋白标准品,使最终浓度为0.5 mg/mL,将所有待检测的蛋白标准品补足到20μL,再加入工作液,用酶标仪测定,计算出蛋白浓度。至溴酚蓝跑至胶底终止电泳,进行转膜。转膜后,将一抗用5%脱脂牛奶稀释,用滤纸吸去残留液后,置于杂交袋内,将抗体溶液加入,4℃孵育过夜后,用PBST在室温下脱色摇床上洗3次,再将二抗用PBST稀释,室温下孵育2 h,用PBST在室温下脱色摇床上洗3次,进行化学发光反应,放入化学发光成像仪中拍照。
图表编号 | XD00110703500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.15 |
作者 | 周瑾、朱莹、陈凯、陈程 |
绘制单位 | 湖南中医药大学、湖南中医药大学第二附属医院、湖南中医药大学、湖南中医药大学 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |