《表1 引物序列:食管鳞癌组织中miRNAs差异表达谱的筛选及研究》

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《食管鳞癌组织中miRNAs差异表达谱的筛选及研究》


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合成cDNA后,以Fast Start Universal SYBR Green Master(Rox)PCR试剂盒扩增目的基因,U6为内参基因,miR-106b-3p、U6引物序列见表1。反应体系为:cDNA产物1.0μl,qPCR Mix10μl,上游引物、下游引物各0.4μl,余用双蒸水补齐至20μl。扩增条件:94℃预变性5 min,94℃30 s、60℃30 s、72℃30 s,40个循环,设立3个复孔。根据扩增曲线得到Ct值,miRNAs含量采用相对表达量2-△△Ct表示。