《表1 细胞培养液添加量:体外消化模型中酸乳β-酪啡肽-7和β-酪啡肽-5的释放及阿片活性》

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《体外消化模型中酸乳β-酪啡肽-7和β-酪啡肽-5的释放及阿片活性》


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注:1.不添加纳洛酮组;2.添加纳洛酮组。

不同处理组的样品(表1)与NG108-15细胞共同培养15 min,加入15%三氯醋酸2.0 mL终止反应。原瓶吹打细胞,3 000 r/min离心10 min,弃上清液;加入50 mmol/L醋酸缓冲液2.0 m L悬浮沉淀,尽量全部移入小瓶,-3 0℃过夜,反复冻融5次,超声波破碎细胞(300 Hz、3 min);17 000×g离心30 min,取上清液于小瓶中沉淀;加入2.0 mL无水乙醇混匀,离心。合并上清液于小瓶中,测定制备液中蛋白质量浓度,60℃烘干,4℃保存待测。