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第一篇 细菌学1

实验一 显微镜油浸镜的使用与细菌形态结构的观察1

一、普通光学显微镜的使用1

二、细菌的基本形态和特殊结构观察3

实验二 细菌动力的观察4

一、悬滴法4

二、压滴法5

三、暗视野显微镜法5

四、半固体琼脂法6

实验三 细菌涂片标本的制备及染色法6

一、单染色法(美蓝或复红)6

三、抗酸染色法7

二、革兰染色法7

四、荧光染色法8

实验四 常用培养基的制备9

一、液体培养基——肉膏汤的制备法9

二、固体、半固体培养基的制备方法10

实验五 细菌的人工培养13

一、分离培养法13

二、纯培养法——斜面、液体、半固体培养基接种法14

三、厌氧培养法15

四、二氧化碳培养法15

实验六 细菌代谢产物观察16

一、单糖发酵试验16

五、枸橼酸盐利用试验17

四、硫化氢试验17

二、细菌色素的产生17

三、靛基质(吲哚)试验17

六、V·P试验18

七、尿素分解实验18

八、甲基红试验18

九、触酶(过氧化氢酶)试验18

十、氧化酶试验18

十一、细胞色素氧化酶试验19

实验七 正常人体和环境中细菌的检查20

一、皮肤细菌的检查20

二、咽喉部细菌的检查20

三、水中细菌检查20

四、空气中细菌的检查20

一、高压蒸汽灭菌法21

实验八 消毒 灭菌 除菌21

二、干烤箱22

三、间歇灭菌22

四、煮沸消毒法22

五、紫外线杀菌22

六、滤过除菌23

七、常用消毒剂的抑菌作用23

八、手指消毒前后的细菌学检查24

九、细菌对抗生素的敏感性试验24

十、细菌对中草药敏感试验25

实验九 噬菌体26

一、噬菌体的分离和鉴定26

二、形态变异27

一、细菌鞭毛的变异27

二、噬菌体的特异性噬菌现象27

实验十 细菌的变异27

三、R因子传递试验28

四、耐药性质粒DNA提取28

实验十一 动物实验方法29

一、小白鼠腹腔接种29

二、动物皮下接种30

三、皮内接种法30

四、静脉内接种法30

五、小鼠颅内接种30

六、感染动物尸体解剖及细菌学检查30

实验十二 病原菌的致病作用32

一、荚膜的致病作用32

七、动物采血32

二、血浆凝固酶的作用33

三、透明质酸酶的侵袭作用33

四、细菌外毒素对机体的毒性及毒素与抗毒素的中和作用33

五、内毒素的致病作用33

六、内毒素的测定——鲎试验34

实验十三 病原性球菌34

一、形态观察与培养特性34

二、抗链球菌溶血素“O”测定35

三、肺炎球菌Optochin敏感试验35

四、肺炎球菌胆汁溶菌试验36

实验十四 病原性球菌的分离与鉴定37

一、脓汁标本中病原菌(葡萄球菌)的分离鉴定37

二、咽拭、血液标本中病原菌(链球菌)的分离鉴定38

三、脑脊液标本中病原菌(脑膜炎球菌)的分离鉴定39

四、痰液标本中病原菌(肺炎球菌)的分离鉴定40

五、泌尿生殖道脓性分泌物的检查41

实验十五 肠道杆菌43

一、生物性状观察43

二、粪便中病原杆菌的分离与鉴定43

三、肥达氏反应48

实验十六 弧菌属50

一、霍乱弧菌50

二、副溶血性弧菌51

实验十七 厌氧菌51

一、芽胞厌氧菌51

二、无芽胞厌氧菌52

二、白喉杆菌培养特性观察53

一、白喉杆菌染色与形态、异染颗粒观察53

实验十八 白喉棒状杆菌53

三、白喉杆菌毒力试验54

四、白喉杆菌标本检查54

实验十九 结核杆菌56

一、结核杆菌染色法与形态观察56

二、结核杆菌培养特性57

三、动物试验57

四、临床标本结核杆菌检查57

实验二十 动物源性细菌58

一、布鲁氏菌属58

二、鼠疫杆菌60

三、需氧芽胞杆菌属60

一、假单胞菌属61

二、嗜血杆菌属61

实验二十一 其它病原性细菌61

三、鲍特氏菌属62

四、军团杆菌属62

五、弯曲菌属63

第二篇 其它微生物及病毒64

实验二十二 支原体64

一、观察支原体的形态及菌落64

二、肺炎支原体的分离培养64

三、冷凝集试验64

实验二十三 立克次体65

一、观察立克次体的形态及染色性65

二、外—斐氏反应65

二、衣原体的分离培养及鉴定66

一、衣原体的形态及染色性66

实验二十四 衣原体66

实验二十五 螺旋体67

一、螺旋体的形态及染色性67

二、差速离心暗视野显微镜检查法67

三、钩端螺旋体的显凝试验68

四、梅毒的血清学检验69

实验二十六 真菌和放线菌70

一、真菌的基本形态和菌落特点70

二、浅部真菌病临床标本检查71

三、深部真菌的观察71

四、真菌小培养法71

五、放线菌病理切片观察71

实验二十七 病毒标本的采集和处理72

三、免疫电镜技术73

二、电子显微镜观察73

实验二十八 病毒的形态观察73

一、光学显微镜观察73

实验二十九 病毒培养法74

一、动物接种法培养病毒74

二、鸡胚接种法74

三、组织培养法75

实验三十 病毒感染的免疫学检测原则77

实验三十一 血凝试验和血凝抑制试验77

一、血凝试验78

二、血凝抑制试验79

三、微量血凝试验和血凝抑制试验80

实验三十二 乙型肝炎的免疫学检测82

一、对流免疫电泳法测HBsAg82

二、ELISA法测乙型肝炎“两对半”83

实验三十三 流行性乙型脑炎患者的血清学诊断——补体结合试验85

实验三十四 核酸分子杂交技术89

一、原理89

二、探针89

三、利用缺口转移技术制备探针的基本原理89

四、点杂交90

五、非放射性(生物素)标记核酸探针91

六、用BiO—HBV探针检测血清中HBV的DNA92

实验三十五 中和试验93

一、中和试验方法一——用已知病毒检测被检血清中和抗体效价93

二、中和试验方法二——用已知免疫血清鉴定病毒型别95

实验三十六 病毒的空斑形成试验96

一、溶菌酶试验98

第三篇 免疫学基础98

实验三十七 机体天然抵抗力的测试98

二、中性粒细胞的吞噬作用99

三、巨噬细胞的吞噬作用100

四、硝基蓝四氮唑(NBT)还原试验101

实验三十八 免疫血清的制备102

一、伤寒杆菌免疫血清的制备102

二、抗红细胞抗体(溶血素)的制备103

三、IgG的提取，纯化及兔抗人IgG免疫血清的制备104

实验三十九 凝集反应105

一、玻片凝集试验105

二、试管凝集试验105

三、间接凝集试验——胶乳凝集抑制试验(妊娠试验)107

四、SPA菌体协同凝集试验107

实验四十 血型鉴定与交叉配血试验108

一、血型鉴定109

二、交叉配血109

实验四十一 沉淀反应110

一、环状沉淀试验110

二、单向琼脂扩散试验——正常人群IgG正常值检测110

三、双向琼脂扩散试验112

四、单向定量免疫电泳(火箭电泳)113

五、免疫电泳113

实验四十二 补体参与的反应及血清补体含量的测定115

一、溶血反应115

二、血清总补体量的测定115

三、补体C3的测定116

四、补体结合反应117

一、免疫荧光技术120

实验四十三 免疫标记技术120

二、免疫酶技术121

三、放射免疫测定123

实验四十四 细胞免疫技术124

一、血液中单个核细胞的分离法124

二、E花环试验126

三、淋巴细胞转化试验127

四、单克隆抗体检测T淋巴细胞亚群试验——微量细胞毒法128

五、白细胞移动抑制试验129

实验四十五 细胞毒试验130

一、抗体生成细胞的检测130

二、HLA血清学检测法——微量淋巴细胞毒试验131

三、HLA细胞学检测法——混合淋巴细胞培养法132

四、溶血分光光度测定法133

实验四十六 超敏反应134

一、动物过敏性休克试验134

二、被动皮肤过敏试验134

三、肥大细胞脱颗粒试验134

四、Ⅲ型超敏反应——Arthus现象135

五、迟发型超敏反应136

实验四十七 生物制品137

一、用于传染病防治的生物制品137

二、用于诊断的生物制品138

附录138

一、中国微生物菌种保藏管理委员会组织机构138

二、国内外有关单位名称缩写对照表139

三、教学代表菌、毒株代号及来源140