《神经解剖学方法》

目录1

第一章　切片的制备1

一、固定1

（一）固定剂溶液的配制2

（二）固定方法4

二、包埋6

（一）石蜡包埋法6

（二）火棉胶及低粘稠度硝化纤维包埋法8

（四）白蛋白-明胶包埋法12

（三）明胶包埋法12

三、切片14

（一）切片刀的选择14

（二）刀的安置15

（三）冰冻切片方法16

（四）振动切片机21

四、贴片21

（一）粘附剂及其使用21

（二）火棉胶及LVN？切片的贴片法23

主要参考文献24

一、尼氏染色法25

第二章　一般染色方法25

（一）焦油紫染色法26

（二）硫堇染色法29

（三）棓花青染色法30

（四）中性红染色法31

二、髓鞘染色法32

（一）Weigert氏法33

（二）Weil氏法34

（三）Kultschitsky氏法35

（四）Haggqvist氏法37

（五）Luxol固蓝法（Klüver-Barrera氏法Salthouse改变法）40

（六）Marchi氏法（Swank-Davenport氏改变法）42

（七）油红染色法44

主要参考文献45

第三章　高尔基技术46

一、快高尔基（Golgi）方法47

二、成年动物Golgi方法50

1．用福尔马林的改变法50

2．长期福尔马林固定的脑组织镀银法51

3．Davenport法51

三、Golgi-Cox方法52

主要参考文献54

第四章　还原银染技术55

一、Cajal整块还原银染及其改变法56

（一）Cajal法56

1．Cajal Ⅲ氨酒精法56

2．Cajal Ⅲ吡啶法57

3．CajalⅥ水化氯醛法57

（二）Holmes还原银染法57

（三）Ranson吡啶银染法58

（四）de Castr0脱钙银染法59

（五）Bodian（蛋白银镀染神经纤维）法60

（六）Rasmussen突触前终末银染法60

二、Bie lschowsky还原银方法62

（一）Bielschowsky原法63

（二）Gros-Lawrentjew改变法63

（三）Marsland-Glees方法64

三、选择性溃变纤维银染法66

（一）选择性溃变银染法中的一般过程及试剂的配制66

3．Fink-HeimerⅠ法70

2．Nauta法70

1．Nauta-Gygax法70

（二）七种选择性溃变纤维或终末银染法的步骤70

4．Wiitanen法71

5．Eager法71

6．Kalaha-Brunst等法72

7．Ebbesson-Sebinson双重镀银法72

（三）观察、解释Nauta等法渍变纤维染色的若干问题73

主要参考文献74

第五章　辣根过氧化物酶法76

（一）HRP的选择77

一、HRP的引入77

（二）酶标配体技术（受体介导吞饮“结合HRP”的标记技术）79

（三）HRP引入中枢神经系的方法86

（四）HRP引入周围神经系的方法93

（五）麻醉剂的应用96

二、存活期96

三、固定97

（一）固定剂的选择97

（二）灌注固定的方法98

四、切片99

五、组织化学反应99

（一）二氨基联苯胺（DAB）法102

1．Malmgren及Olsson法103

2．Streit及Ruebi法104

3．钴-葡萄糖氧化酶法104

（二）联苯胺（BDHC）法106

1．Mesulam法106

2．Mesulam及Carson法107

3．舒斯云的Riley-Marchand改变法107

（三）邻-联茴香胺（OD）法108

（四）四甲基联苯胺（TMB）法109

（五）Hanker-Yates氏法112

六、结果的评定113

（一）有效注射范围的确定114

（二）过路纤维问题115

（三）顺行标记终枝的辨认116

（四）假象问题117

（五）阳性及阴性结果的分析119

主要参考文献121

第六章　逆行荧光物标记法124

一、逆行荧光物的种类124

二、各种荧光物标记神经细胞的特征125

三、逆行荧光物标记神经元的实验步骤129

四、逆行荧光标记和递质组织化学方法的结合131

（一）逆行荧光标记与冰冻干燥-甲醛诱发荧光组织化学结合法131

（二）逆行荧光标记与Faglu-sucrose单胺荧光法的结合132

（三）逆行荧光标记和乙酰胆碱酯酶结合法133

（四）逆行荧光标记和AChE药理学结合法134

（五）逆行荧光标记和免疫组织化学结合法135

主要参考文献136

第七章　放射自显影术137

（一）放射性示踪剂的选择138

一、放射性示踪剂的引入138

（二）放射性示踪剂溶液的配制143

（三）放射性示踪剂的引入方法144

二、存活期、固定、切片、贴片145

（一）存活期145

（二）固定146

（三）切片146

（四）贴片147

三、涂布原子核乳胶148

（一）乳胶的选择148

（二）影响乳胶潜影形成的因素149

（三）涂敷液体原子核乳胶的方法150

四、曝光154

（一）干燥154

（二）温度155

（三）曝光期155

（四）高速（闪烁）自显影156

五、显影、定影、染色157

（一）显影、定影157

（二）染色159

六、双标记法160

（一）3H-apo-HRP与HRP双标记法160

（二）3H及33S双标记法161

七、结果的分析163

（一）有效注射范围163

（二）逆行标记及过路纤维问题165

（三）本底165

（四）化学显影166

八、脱氧葡萄糖法167

（一）14C-2DG法168

（二）3H-2DG法169

主要参考文献173

一、Falck-Hillarp法（甲醛诱发荧光法，简称FA法）175

第八章　荧光组织化学方法175

（一）荧光反应的化学原理176

（二）冰冻干燥-石蜡切片法179

（三）震动切片-甲醛法182

（四）铺片法184

（五）涂片法184

二、乙醛酸法（GA法）184

（一）乙醛酸法的荧光反应原理185

（二）震动切片-乙醛酸法185

（三）冰冻切片-乙醛酸法189

（四）冰冻切片-甲醛-乙醛酸法190

（五）冰冻干燥甲醛-乙醛酸法191

主要参考文献192

第九章　免疫细胞化学法简介194

主要参考文献201

附录　缓冲液的配制202

一、磷酸缓冲液202

二、醋酸缓冲液203

三、Tris缓冲液204

四、二甲胂酸盐缓冲液205