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目录1

第一章 切片的制备1

一、固定1

(一)固定剂溶液的配制2

(二)固定方法4

二、包埋6

(一)石蜡包埋法6

(二)火棉胶及低粘稠度硝化纤维包埋法8

(四)白蛋白-明胶包埋法12

(三)明胶包埋法12

三、切片14

(一)切片刀的选择14

(二)刀的安置15

(三)冰冻切片方法16

(四)振动切片机21

四、贴片21

(一)粘附剂及其使用21

(二)火棉胶及LVN?切片的贴片法23

主要参考文献24

一、尼氏染色法25

第二章 一般染色方法25

(一)焦油紫染色法26

(二)硫堇染色法29

(三)棓花青染色法30

(四)中性红染色法31

二、髓鞘染色法32

(一)Weigert氏法33

(二)Weil氏法34

(三)Kultschitsky氏法35

(四)Haggqvist氏法37

(五)Luxol固蓝法(Klüver-Barrera氏法Salthouse改变法)40

(六)Marchi氏法(Swank-Davenport氏改变法)42

(七)油红染色法44

主要参考文献45

第三章 高尔基技术46

一、快高尔基(Golgi)方法47

二、成年动物Golgi方法50

1.用福尔马林的改变法50

2.长期福尔马林固定的脑组织镀银法51

3.Davenport法51

三、Golgi-Cox方法52

主要参考文献54

第四章 还原银染技术55

一、Cajal整块还原银染及其改变法56

(一)Cajal法56

1.Cajal Ⅲ氨酒精法56

2.Cajal Ⅲ吡啶法57

3.CajalⅥ水化氯醛法57

(二)Holmes还原银染法57

(三)Ranson吡啶银染法58

(四)de Castr0脱钙银染法59

(五)Bodian(蛋白银镀染神经纤维)法60

(六)Rasmussen突触前终末银染法60

二、Bie lschowsky还原银方法62

(一)Bielschowsky原法63

(二)Gros-Lawrentjew改变法63

(三)Marsland-Glees方法64

三、选择性溃变纤维银染法66

(一)选择性溃变银染法中的一般过程及试剂的配制66

3.Fink-HeimerⅠ法70

2.Nauta法70

1.Nauta-Gygax法70

(二)七种选择性溃变纤维或终末银染法的步骤70

4.Wiitanen法71

5.Eager法71

6.Kalaha-Brunst等法72

7.Ebbesson-Sebinson双重镀银法72

(三)观察、解释Nauta等法渍变纤维染色的若干问题73

主要参考文献74

第五章 辣根过氧化物酶法76

(一)HRP的选择77

一、HRP的引入77

(二)酶标配体技术(受体介导吞饮“结合HRP”的标记技术)79

(三)HRP引入中枢神经系的方法86

(四)HRP引入周围神经系的方法93

(五)麻醉剂的应用96

二、存活期96

三、固定97

(一)固定剂的选择97

(二)灌注固定的方法98

四、切片99

五、组织化学反应99

(一)二氨基联苯胺(DAB)法102

1.Malmgren及Olsson法103

2.Streit及Ruebi法104

3.钴-葡萄糖氧化酶法104

(二)联苯胺(BDHC)法106

1.Mesulam法106

2.Mesulam及Carson法107

3.舒斯云的Riley-Marchand改变法107

(三)邻-联茴香胺(OD)法108

(四)四甲基联苯胺(TMB)法109

(五)Hanker-Yates氏法112

六、结果的评定113

(一)有效注射范围的确定114

(二)过路纤维问题115

(三)顺行标记终枝的辨认116

(四)假象问题117

(五)阳性及阴性结果的分析119

主要参考文献121

第六章 逆行荧光物标记法124

一、逆行荧光物的种类124

二、各种荧光物标记神经细胞的特征125

三、逆行荧光物标记神经元的实验步骤129

四、逆行荧光标记和递质组织化学方法的结合131

(一)逆行荧光标记与冰冻干燥-甲醛诱发荧光组织化学结合法131

(二)逆行荧光标记与Faglu-sucrose单胺荧光法的结合132

(三)逆行荧光标记和乙酰胆碱酯酶结合法133

(四)逆行荧光标记和AChE药理学结合法134

(五)逆行荧光标记和免疫组织化学结合法135

主要参考文献136

第七章 放射自显影术137

(一)放射性示踪剂的选择138

一、放射性示踪剂的引入138

(二)放射性示踪剂溶液的配制143

(三)放射性示踪剂的引入方法144

二、存活期、固定、切片、贴片145

(一)存活期145

(二)固定146

(三)切片146

(四)贴片147

三、涂布原子核乳胶148

(一)乳胶的选择148

(二)影响乳胶潜影形成的因素149

(三)涂敷液体原子核乳胶的方法150

四、曝光154

(一)干燥154

(二)温度155

(三)曝光期155

(四)高速(闪烁)自显影156

五、显影、定影、染色157

(一)显影、定影157

(二)染色159

六、双标记法160

(一)3H-apo-HRP与HRP双标记法160

(二)3H及33S双标记法161

七、结果的分析163

(一)有效注射范围163

(二)逆行标记及过路纤维问题165

(三)本底165

(四)化学显影166

八、脱氧葡萄糖法167

(一)14C-2DG法168

(二)3H-2DG法169

主要参考文献173

一、Falck-Hillarp法(甲醛诱发荧光法,简称FA法)175

第八章 荧光组织化学方法175

(一)荧光反应的化学原理176

(二)冰冻干燥-石蜡切片法179

(三)震动切片-甲醛法182

(四)铺片法184

(五)涂片法184

二、乙醛酸法(GA法)184

(一)乙醛酸法的荧光反应原理185

(二)震动切片-乙醛酸法185

(三)冰冻切片-乙醛酸法189

(四)冰冻切片-甲醛-乙醛酸法190

(五)冰冻干燥甲醛-乙醛酸法191

主要参考文献192

第九章 免疫细胞化学法简介194

主要参考文献201

附录 缓冲液的配制202

一、磷酸缓冲液202

二、醋酸缓冲液203

三、Tris缓冲液204

四、二甲胂酸盐缓冲液205

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