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目录1

第一篇 常用生物化学实验技术及原理1

第一章 实验的准确性1

一、单位和量1

（一）基本单位1

（二）导出单位2

（三）词头3

（四）与SI并用的单位3

（五）摩尔和浓度4

二、准确测量5

（一）误差来源5

（二）正态分布曲线8

（三）生物材料中数据的变化10

（四）容量玻璃仪器11

三、实验报告11

（一）结果的记录11

（二）表格和图解13

一、膜17

第二章 透析17

二、溶剂18

三、物理条件18

四、Donnan膜平衡18

第三章 层析法20

一、柱层析法的一般技术21

二、几种常用的层析法24

（一）吸附层析24

（二）离子交换层析25

（三）分配层析30

（四）薄层层析35

（五）凝胶层析37

第四章 电泳技术43

一、电泳技术基本原理44

（一）电场强度（电势梯度）45

（二）溶液的pH值46

（三）溶液的离子强度46

（四）电渗现象47

二、纸电泳47

三、醋酸纤维薄膜电泳48

四、琼脂凝胶电泳49

五、聚丙烯酰胺凝胶电泳50

第五章 分光光度法60

一、原理60

二、分光光度计的基本部件63

（一）光源63

（二）单色器64

（四）检测器65

（三）吸收池65

（五）测量装置67

三、几种国产分光光度计的介绍67

（一）72型分光光度计67

（二）721型分光光度计68

（三）751G型分光光度计69

第六章 放射性同位素技术72

一、基本知识72

（一）同位素72

（三）放射性衰变的规律74

（二）射线的性质74

（四）放射性强度的单位76

二、射线的探测76

（一）盖革计数器77

（二）闪烁计数器77

三、放射自显影术78

四、放射性同位素法的优缺点79

一、基本原理80

二、仪器的构造80

第七章 Warburg氏呼吸计测压法80

三、仪器使用的理论和操作要点81

（一）操作要点和计算方法81

（二）温压计82

（三）反应瓶体积的测定83

第八章 实验样品的制备86

一、组织样品86

二、血液样品88

三、尿液样品88

实验一 总氮量的测定——凯氏定氮法91

第二篇 学生实验91

第九章 蛋白质的化学91

实验二 氨基酸的分离鉴定——纸层析法97

实验三 蛋白质的性质实验（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应99

实验四 蛋白质的性质实验（二）——蛋白质的等电点测定和沉淀反应109

实验五 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳116

实验六 酪蛋白的制备119

实验七 甲醛滴定法测定氨基氮121

实验八 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定124

第十章 核酸的化学124

实验九 菜花（花椰菜）中核酸的分离和鉴定126

实验十 醋酸纤维薄膜电泳分离核苷酸130

实验十一 薄层层析法分离AMP、ADP和ATP132

第十一 章酶136

实验十二 酶的特性136

实验十三 枯草杆菌蛋白酶活力测定142

实验十四 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定145

实验十五 酶浓度对酶促反应速度的影响——用分光光度法测定碱性磷酸酶活性148

实验十六 胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定152

第十二章 组织代谢159

实验十七 肌糖原的酵解作用159

实验十八 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较162

实验十九 血糖的定量测定——Hagedorn-Jensen二氏定糖法165

实验二十 胰岛素对血糖浓度的影响169

实验二十一 发酵过程中无机磷的利用170

实验二十二 脂肪酸的β-氧化173

实验二十三 精氨酸酶的作用176

实验二十四 氨基移换反应（一）——血液中转氨酶活力的测定（分光光度法）179

实验二十五 氨基移换反应（二）——谷丙转氨酶活性的测定（纸层析法）182

第十三章 柱层析法的基本训练186

实验二十六 用阳离子交换树脂摄取氯化钠186

第三篇 演示实验188

实验二十七 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳（血清蛋白的分离）188

实验二十八 离子交换柱层析法分离氨基酸193

实验二十九 凝胶过滤法测定蛋白质分子量196

实验三十 血红蛋白的两性解离200

实验三十一 紫外分光光度法测定核酸的含量202

实验三十二 透析实验（一）蛋白质的透析204

实验三十三 透析实验（二）糖类的透析205

实验三十四 锂盐存在时蔗糖的燃烧207

实验三十五 用铂和血液过氧化氢酶分解过氧化氢207

实验三十六 肝组织耗氧量的测定209

实验三十七 用碳酸钙分离菠菜的色素212

实验三十八 吸附层析法分离叶子色素213

实验三十九 用32P测定小麦幼苗根部的吸收功能215

实验四十 小白鼠氨中毒217

一、实验室规则219

附录219

二、实验室基本操作220

（一）玻璃仪器的洗涤220

（二）搅拌和振荡221

三、常用仪器的使用222

（一）容量玻璃仪器的使用方法222

（二）台秤225

（三）光学天平226

（四）分光光度计229

（五）电动离心机234

（六）干燥箱和恒温箱235

（七）电热恒温水浴237

（八）电冰箱237

（九）酸度计238

四、常用缓冲溶液的配制241

（一）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液242

（四）磷酸盐缓冲液243

（三）醋酸-醋酸钠缓冲液243

（二）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液243

（五）巴比妥钠-盐酸缓冲液245

（六）Tris-盐酸缓冲液245

（七）碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液246

五、常用酸碱指示剂246

六、常用酸碱试剂的浓度及比重247

七、标准溶液的制备和标定247

八、元素的原子量表250

九、基础生物化学实验学生使用仪器清单（一组）251