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第一章 男性学基础检验1

一、精液检验1

(一)精液产生和收集精液标本的要求1

(二)收集精液标本的方法及其注意事项2

(三)射精液分段收集检查法3

(四)精液的理化检查法4

二、睾丸活体组织检查法15

(一)睾丸活检方法16

(二)睾丸活检适应症及其评价17

(三)人正常睾丸的组织学和细胞学检查18

(四)人睾丸活检标本记分法21

(五)无精症和重度少精症的睾丸活体组织检查21

(六)青春期延迟及停滞的睾丸活体组织检查25

(七)睾丸异常的外科处理26

(八)睾丸活体组织检查技术的结语27

第二章 精子及其检查技术28

一、精子光镜及电镜涂片固定检查法28

二、精子包埋切片染色检查法(睾丸活体组织检查)30

三、精液标本包埋染色检查法33

四、精子形态学检查34

五、精子形态学分类及其质量检查39

六、精子形态学评定检查40

七、精子活力检查对男子生育力的估计41

八、精子受精率的检查41

九、精子受精能力体外检查法42

实验一:去透明带地鼠卵精子穿透试验42

实验二:Aitken氏改良法43

十、死活精子检查法(Eosin test)44

十一、精子运动力检查法44

十二、精子运动状态检查法45

十三、精子活动力测定46

十四、精子活动度测定48

十五、精子活动力评价的检查50

十六、精子活动光学检查法51

十七、精子临床群体分析法52

十八、精子活动轨迹测定53

十九、精子运动器械测定法54

二十、精子的光学向异性检查55

二十一、精子运动的激光与核磁共振(NMR)检测56

二十二、精子活动力检测方法的评价57

二十三、精子抗体测定方法58

(一)酶联免疫吸附试验(ELISA)58

(二)ELISA间接法58

(三)溶液配制60

二十四、精子抗体检测试验(改良法)61

二十五、精子循环免疫复合物(CICs)检测法62

第三章 男性学临床检查69

一、男性性激素LH及FSH的检查69

二、血清和尿液的性激素LH及FSH的放射免疫测定法71

(一)LH和FSH放射免疫测定的试剂71

(二)放射性碘LH及FSH的制备72

(三)性激素LH及FSH的精密测定法73

(四)性激素FSH的放射免疫测定法74

(五)性激素LH的放射免疫测定法76

(六)WHO拟订的FSH检测法78

(七)WHO拟订的LH检测法83

(八)FSH检测方法之二83

(九)尿液LH快速检测法90

三、唾液睾丸酮(T)放射免疫检测法91

(一)材料91

(二)睾丸酮放射免疫测定法91

(三)唾液和血液睾丸酮的测定92

(五)说明及讨论93

(四)唾液睾丸酮放射免疫测定方法的评价93

四、人类绒毛膜促性腺激素(HCG)的放射免疫检测法94

(一)HCG放射免疫测定94

(二)HCG面相放射免疫检测法95

(三)HCG放射免疫检测法诊断早孕98

五、性交后试验(PCT)100

六、精子爬高试验102

七、精液分析评判男性生育力103

八、人类精子冷冻保存法106

(一)精液冷冻保存及其临床价值107

(二)精子冷冻保存成功的条件108

(三)冷冻精子的收集和处理法109

(四)精液的冷冻与解冻113

九、子宫颈粘液及其试验检查113

十、精子穿透子宫颈粘液试验(毛细管法)114

十一、精子宫颈粘液接触试验(SCMC)115

十二、人工授精技术方法116

(二)夫妇咨询117

(一)人工授精的适应症117

(三)丈夫精液人工授精(AIH)118

(四)供精者的选择119

(五)人工授精的技术处理120

(六)受孕率124

(七)冷冻精液人工授精技术方法学124

第四章 精液及精子免疫学检查125

一、精液及血清放射免疫学检查法125

二、放射免疫检查法的基本原理126

(一)抗原的制备128

(二)抗体的制备128

(三)标记抗原的制备128

(四)被测样品的纯化128

(五)抗原—抗体复合物(B)与游离抗原(F)的分离129

三、血清睾丸酮(T)的放射免疫检测法129

(一)血浆睾丸酮(T)放射免疫检测纲要130

(二)血浆睾丸酮(T)的检测130

(三)睾丸酮(T)放射免疫检测方法131

(四)血浆睾丸酮放射免疫快速检测法136

(五)血浆游离睾丸酮浓度的检测法137

(六)血浆游离睾丸酮在生理情况下的流动透析检测技术137

(七)精液睾丸酮的放射免疫检测法137

(八)血清或血浆睾丸酮放射免疫检测法140

四、人类精子自身免疫和同种异体免疫检测技术147

(一)精子凝集试验148

(二)明胶凝集试验148

(三)毛细血管凝集试验151

(四)浅盘凝集试验152

(五)玻片凝集试验153

(六)试管—玻片凝集试验154

(七)交叉凝集试验156

(八)各种凝集试验的评价156

五、补体依赖试验技术156

六、精子制动试验158

(二)精子制动试验159

(一)胡氏试验159

(三)妇女血清精子制动抗体定量试验161

七、精子细胞毒试验163

(一)精子细胞毒试验163

(二)D′almeida改良法165

八、微量法精子制动和精子细胞毒性试验165

(一)试剂和设备166

(二)检测方法166

(一)革兰氏染色细菌检查168

一、精液细菌及其他微生物染色检查法168

第五章 精液的微生物学检查168

(二)精液吖啶橙染色技术荧光镜检查169

(三)美蓝或亚甲蓝染色技术169

二、精液细菌培养检查法169

三、精液内可能存在的病菌及其他微生物170

四、支原体菌属的检查171

五、艾滋病毒(AIDS HIV)的精液、血液及血浆的诊断检查172

(二)不明原因的不育症177

(三)免疫学因素177

一、体外受精胚胎移植的适应症177

(一)输卵管疾病177

第六章 体外受精胚胎移植技术(试管婴儿)177

(四)少精症178

二、体外受精及胚胎移植的实施方案178

(一)病人选择178

(二)病人准备179

(三)选择病人的条件180

三、病人准备181

四、腹腔镜检技术182

(二)精子制备183

(三)受精183

(一)人卵制备183

五、胚胎细胞分裂184

六、胚胎移植184

七、检查妊娠的建立185

八、体外受精胚胎移植的结果185

九、体外受精的新进展186

(一)阳萎的定义187

十、阳萎的诊断和治疗187

(二)阳萎的一般病因188

(三)医源性阳萎189

(四)射精障碍的疾病190

(五)阳萎的诊断190

(六)阳萎的治疗192

十一、抑制素的检测法193

(一)抑制素的检测法简介194

(二)抑制素检测方法195

(三)抑制素的提纯及其特性的研究200

第七章 精液生物化学检验209

一、精液生物化学主要成分的正常值209

二、精液内已知的生物化学物的检测210

三、精液果糖检测法213

四、精液蛋白质检测法217

(一)Lowry氏改良法217

(二)紫外线吸收法218

(三)比色法219

(四)双缩脲法220

五、精液酸性磷酸酶检测法222

(一)P—硝基酸磷酸盐检测法222

(二)精液酸性磷酸酶检测法223

六、精液碱性磷酸酶检测法224

七、精液甘油磷酸胆碱检测法225

八、精液镁检测法227

九、精液锌检测法228

(一)吡啶偶氮萘酸比色法228

(三)原子吸收分光光度法230

(二)荧光法230

(四)锌原子吸收分光光度计测量法231

十、精液丙酮酸和乳酸检测法231

(一)分光光度法232

(二)比色法232

(三)精液乳酸检测法232

十一、精液枸橼酸检测法234

十二、精液精氨酸检测法235

(一)明胶水解法237

十三、精液素检测法237

(二)雌酮水解法238

十四、精液肉碱检测法239

十五、精液免疫球蛋白(Ig)检测法240

(一)免疫球蛋白分类240

(二)精液免疫球蛋白电泳检测法之一243

(三)精液免疫球蛋白扩散检测法之二244

(四)精液免疫球蛋白扩散检测法244

(五)血清IgG放射火箭电泳自显影检测法245

十六、精液前列腺素检测法246

(六)血清免疫球蛋白IgG放射免疫检测法246

(一)抗血清的制备248

(二)试剂配制249

(三)样品提取250

(四)柱层析分离和纯化250

(五)测定程序251

(六)注意事项253

十七、精子酶检测法254

(一)精子离心法254

(二)蔗糖液离心法254

(三)精子顶体提取及破坏254

十八、精子乳酸脱氢酶同功酶LDH—c4(LDH—x)的检测法256

(一)LDH—x活性检测法——豚鼠精子标本257

(二)各部位的精子悬液涂片257

(三)比较精子中段线粒体LDH—x的活性强度258

(四)人类精子LDH—x活性的检测258

(一)精子的制备260

十九、精子膜的检查260

(二)精子的裂解261

(三)精子膜形态的检查262

(四)精子膜免疫细胞化学检查技术264

(五)精子膜的生物化学检查265

二十、精子成熟过程中表面性质电荷改变的检查267

二十一、精子顶体素的类型及检测法268

(一)游离顶体素268

(二)顶体素抑制因子复合物269

(三)前顶体素269

二十二、精子透明质酸酶的检测270

第八章 人类精子染色体检查法272

一、外周血染色体标本的制备及检查法272

(一)取血272

(二)培养272

(三)秋水仙素处理272

(八)再固定273

(七)再离心273

(九)三次离心273

(五)低渗处理273

(六)预固定273

(四)离心273

(十)三次固定274

(十一)四次离心274

(十二)四次固定274

(十三)制片274

(十四)染色274

(十五)镜检及摄影274

(十六)核型分析274

二、注意事项275

三、正常精子染色体标本制备及检查法275

四、正常精子X性染色体标本的制备及检查法276

(一)标本制备276

(二)各种染色液的配制法277

(三)精子猩红——固绿染色法278

五、正常精子Y性染色体标本的制备及检查法279

(四)精子石炭酸复红染色法279

(一)标本制备280

(二)试剂Mollcaine缓冲液的配制法280

(三)0.005%氮芥奎纳克林水溶液的配制法280

(四)精子Y染色体的检查法280

七、人类精子染色体的直接分析法282

六、睾丸生殖细胞染色体检查法283

第九章 单克隆抗体制备及其检测技术287

一、单克隆抗体技术的发现及其价值287

(一)代替某些生物活性物质288

(二)用于组织相容性抗原分型和血型的鉴别288

(三)用于细胞表面抗原的鉴别288

(四)用于阐明生殖生理现象288

(五)对某些疾病的诊断和治疗289

(六)用于男性学和计划生育学的研究289

(八)用于抗原提纯290

(九)用于抗原分子免疫决定簇的分布、结构与功能的研究290

(七)对细菌、病毒和寄生虫等的特异抗原检测290

(十)特定的单克窿抗体用于抗过敏治疗291

(十一)用于鉴别马的疾病291

二、单克隆抗体制备的原理和方法291

(一)人类精子单克隆抗体的制备法之一294

(二)人类精子单克隆抗体的制备法之二295

(三)收集骨髓瘤细胞296

(四)克隆骨髓瘤细胞297

(六)注意事项298

(五)精子单克隆抗体制备的程序298

(七)人类精子膜抗原单克隆抗体制备法301

附录305

一、常用试剂溶液及培养基的配制方法305

二、度量衡公制单位数值表317

四、精液射出的顺序及其生化物质327

五、精液实验分析的通用名词328

六、异常形态精子检查记录表328

七、人工授精各方应签署的文件(建议稿)328

三、试剂溶液稀释通用计算法337

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