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绪论3

第一章 制片用的器材与工作守则一、基本仪器3

(一)切片机3

目录3

(二)切片刀与磨刀技术4

(三)显微镜8

(四)恒温箱9

(五)冰箱9

(六)天平9

(七)载玻片染色机10

(八)电热恒温水浴锅10

(九)酸度计10

(十)微型真空泵10

(一)剪刀11

(三)解剖刀11

(二)镊子11

(十一)电动离心机(或手摇离心机)11

二、常用工具11

(十二)转台11

(四)解剖针12

(五)取片匙13

(六)毛笔13

(七)放大镜13

(八)刀片13

(九)切片盒与烘片架13

(十)笔式金钢钻(玻璃刀)13

(二)盖玻片14

(一)载玻片14

三、玻璃器材14

(三)染色缸15

(四)树胶瓶15

(五)培养皿16

(六)量筒16

(七)烧杯16

(八)染色碟16

(九)微型凹面皿或凹面载玻片16

(十三)称量瓶17

(十六)双重蒸馏器17

(十四)玻璃漏斗17

(十五)酒精灯17

(十二)玻璃滴瓶17

(十一)双层滴瓶17

(十)试剂瓶17

四、普通试剂18

(一)脱水剂18

(二)透明剂19

(三)粘贴剂20

(四)包埋剂21

(五)封固剂21

五、工作守则22

第二章 标本的选择与固定24

一、标本的选择原则24

(一)取材准确24

(二)取材典型24

(一)要求麻醉标本25

(五)取材清洁25

二、固定的注意事项25

(三)取材完整25

(四)取材适时25

(二)要求尽早固定26

(三)要求小而薄的组织块26

(四)要求小心切割标本28

(五)要求保持组织原形28

(六)要求预先确定切削面28

(七)要求抽除组织块内空气30

(八)要求固定后洗涤31

三、固定形象与固定液的选择31

(一)两种固定形象31

(二)选择固定液的原则32

四、二氯化汞类固定液32

(二)赫利(Helly)氏固 定液(简称Z.F)配法33

(一)曾克(Zenker)氏固定液(简称Z.A)配法33

(三)马克西莫(Maxi-mow)氏固定液配 法34

(四)杰尔森(Gilson)氏固定液配法34

(五)肖丁(Schaudinn)氏固定液配法34

(六)苏萨(Susa)固定液配法34

(七)丹思契可夫(Dan-chakaff)氏固定液配法35

(八)武斯特(Worcester)氏固定液配法35

(九)本斯利(Bensley)氏固定液配法35

五、重铬酸钾类固定液36

(一)苗勒(Müller)氏固定液配法36

(二)奥塞(Orth)氏固定液配法36

(三)特利逊士克(Tell-yesnicky)氏固定液配法36

六、苦味酸类固定液37

(六)查西奥(Ciaccio)氏固定液配法37

(四)史密斯(Smith)氏固定液配法37

(五)厄利(Erlicki)氏固定液配法37

(一)波因(Bouin)氏固定液配法38

(二)木耶(moyer)氏固定液配法39

(三)细中胞心体固定液配法39

(四)盖奇(Gage)氏固定液配法39

(五)苦味酸-硫酸混合固定液配法39

(六)拉伯尔(Rabl)氏固定液配法39

(七)弗恩拉思(Vonath)氏固定液配法39

(八)苏萨(Susa)改良波因氏固定液配法40

七、酒精类固定液40

(一)卡诺(Carnoy)氏Ⅰ固定液配法40

(二)卡诺(Carnoy)氏Ⅱ固定液配法40

(三)卡诺-莱勃苯(Car-noy-Lebrun)氏固定液配法40

(一)药液配制41

八、锇酸类固定液41

(二)漂白方法42

九、铬酸类固定液43

(一)弗莱明(Flemming)氏改良固定液配法43

(二)德斯梯(De stim)氏固定液配法43

(三)戈尔德斯米斯(Go-ldsmith)氏固定液配法43

(四)弱铬酸-醋酸固定液配法44

(五)适度铬酸-醋酸固定液配法44

(六)强铬酸-醋酸固定液配法44

(七)铬酸-醋酸-甲醛混合固定液配法44

(八)佩伦夷(Perenyi)氏固定液配法44

(九)那瓦新(NaWashin)氏固定液配法45

十、甲醛类固定液45

(四)莫斯曼(Mossrnan)氏固定液配法46

(三)洛夫特斯克(Lov-dowsky)氏固定液配法46

(二)甲醛-丙酸-酒精固定液(简称FPA)配法46

(一)植物通用固定液(简称FAA)配法46

(五)卡尔(Kahle)氏固定液配法47

第三章 染料与染色液的应用一、染色原理48

(一)物理作用48

(二)化学作用48

二、各种常用染料49

(一)天然染料49

(二)煤焦染料50

三、各种苏木精染色液52

(一)汉登海(Heiden-hain)氏苏木精染色液(又称铁矾苏木精染色液)配法52

(二)德拉菲尔德(Dela-field)氏苏木精染色液配法53

(六)粘液苏木精染色液配法54

(五)迈耶(Mayer)氏苏木精染色液配法54

(四)埃利希(Ehrlich)氏苏木精染色液配法54

(三)哈里斯(Harris)氏苏木精染色液配法54

(七)美尔蓝(Mallory)氏苏木精染色液配法55

(八)鲍牟尔(B?nmer)氏苏木精染色液配法55

(九)汉森(Hansen)氏苏木精染色液配法55

四、各种洋红染色液56

(一)酒精洋红染色液配法56

(二)醋酸洋红染色液配法56

(三)硼砂洋红染色液配法57

(四)钾矾胭脂红染色液配法57

(五)格林拉(Grenaeher)氏染色液配法57

(六)迈耶(Mayer)氏洋红染色液配法57

(七)比尔(Beal)氏洋红染色液配法57

(一)曙红染色液58

五、其它染色液58

(八)粘液洋红染色液配法58

(二)藻红染色液配法59

(三)番红染色液59

(四)固绿染色液59

(五)酸性复红染色液配法60

(六)波尔多红染色液配法60

(七)中性红染色液配法60

(八)雷琐辛复红染色液别名维格雷特氏弹性纤维染色液配法60

(九)刚果红染色液配法61

(十)龙胆紫染色液61

(十一)甲烷紫染色液配法61

(十二)青苷别名喹啉蓝染色液配法61

(十六)甲基绿染色液配法62

(十七)桔黄G染色液62

(十四)丹纳绿染色液配法62

(十五)亮绿染色液配法62

(十三)里昂蓝别名酒精溶性苯胺蓝染色液配法62

(十八)俾士麦棕染色液配法63

(十九)地衣红染色液配法63

(二十)硫堇别名劳氏青莲染色液配法63

第四章 石蜡切片制作方法64

一、脱水64

二、透明66

三、兼脱水作用的透明剂67

(一)正丁醇使用法68

(二)萜品醇使用法68

四、浸蜡69

(一)浸蜡药品与用具69

(二)浸蜡方法70

(一)石蜡包埋药品和用具71

五、石蜡包埋71

(二)两种石蜡包埋方法72

(三)石蜡包埋后出现混浊结晶的原因分析73

(四)快速石蜡包埋法74

六、石蜡包埋块的修整75

(一)石蜡包埋块的分割75

(二)蜡块在台木上的装置76

(三)蜡块细修整77

七、石蜡包埋块的切削78

(一)用具78

(二)切削方法78

(三)切削质量低劣的分析与改正措施79

(二)氢氧化钠或三氯醋酸软化法82

八、脆硬组织难以切削时的补救办法82

(一)水软化法82

(三)氢氟酸-甘油软化法83

(四)冰冻法83

九、蜡片的贴附83

(一)温水展平粘贴法83

(二)玻璃条展平粘贴法85

(三)切片脱落原因的分析85

十、石蜡切片苏木精-曙红染色法86

(一)用具与药品86

(二)染色程序与方法86

(三)注意事项88

第五章 火棉胶切片制作方法一、脱水89

(二)浸火棉胶方法90

二、浸火棉胶90

(一)主要用具与药品90

三、火棉胶包埋91

(一)用具与药品91

(二)火棉胶包埋方法91

四、火棉胶包埋块的修整92

(一)包埋块的分割92

(二)火棉胶包埋块在台木上的装置92

五、火棉胶包埋块的切削94

(一)用具与药品94

(二)切削方法94

(三)切削质量低劣的原因分析95

(一)用具与药品96

(二)染色程序与方法96

六、火棉胶切片苏木精-曙红染色法96

第六章 冰冻切片制作方法99

一、取材与固定99

二、冰冻与切削方法99

(一)二氧化碳冰冻切片99

(二)半导体致冷器冰冻切片100

三、冰冻切片贴附与苏木精-曙红染色法102

(一)用具与药品102

(二)贴附与染色方法102

第七章 其它切片法103

一、聚苯乙烯包埋切片103

(一)主要用具与药品103

(二)包埋技术104

(四)染色105

(三)切片与粘附105

二、碳蜡包埋切片106

(一)主要用具与药品106

(二)制备方法106

三、徒手切片108

(一)标本的选择108

(二)用具与药品108

(三)切削方法109

(四)染色方法110

四、假包埋切片与无包埋切片110

第八章 非切片法111

一、整体装片111

(一)甘油与甘油胶封固法111

(三)甘油、二甲苯、树胶封固法112

(二)正丁醇树胶封固法 112

(四)二甲苯树胶封固法 113

二、涂布法114

三、压碎法115

四、离析法115

(一)铬酸-硝酸分离法 115

(二)硝酸-氯酸钾离析法116

(三)盐酸-氢氧化钾法116

第九章 细胞学制片117

一、线粒体117

(一)里戈特(Regaud)氏染色法117

(二)哈木德(Harmond)118

氏染色法(1950)118

(三)汉登海(Heiden-hain)氏苏木精-苦味酸-复红染色法(Mallorog氏改良,1968)119

(五)白细胞活体染色法120

(四)本塞利-考德里(Bensley-Cowdry)氏染色法120

二、高尔基体121

(一)阿耶马(Aoyama)氏法121

(二)雷蒙·爱·凯杰尔(Ramon y cajal)氏法122

(三)达·范诺(Da Fano)氏法123

三、染色体123

(一)洋葱、蚕豆根尖细胞示染色体123

(二)大麦、蚕豆、洋葱染色体C式分带显示法124

(三)果蝇唾腺示染色体126

(四)人外周血淋巴细胞示染色体127

(五)G式分带显示法(Gallmon Richa-rdson 1973)131

(六)C式分带显示法(Sumner 1972)132

(八)姐妹染色单体差别染色法(改良)133

(七)R式分带显示法(Dulrillaux等1971)133

四、细胞分裂134

(一)洋葱根切片示植物细胞有丝分裂134

(二)马蛔虫卵切片示动物细胞有丝分裂、纺锤丝、中心体135

(三)蚕豆、玉米、水稻花粉母细胞示减数分裂137

(四)雄蝗虫精巢切片示减数分裂(成熟分裂)139

第十章 微生物学制片140

一、多角体病毒140

(一)棉铃虫幼虫示核型多角体,松毛虫示质型多角体涂片140

(二)棉铃虫幼虫示核型多角体,松毛虫示质型多角体切片140

二、细菌143

(一)革兰(Gram)氏染色法143

(二)罗弗(Leffer)氏染色法144

(三)浦飞弗尔(Pfei-ffer)氏染色法144

(五)青虫菌、松毛虫杆菌芽孢染色法145

(四)细菌三型简易制片145

(六)钾细菌(硅酸盐细菌)荚膜染色法146

(七)细菌鞭毛染色法(B1endon 1965)146

三、放线菌148

(一)石炭酸-复红染色法148

(二)结晶紫-苦味酸-洋红染色法148

四、真菌149

(一)酵母菌示出芽生殖涂片149

(二)根霉装片150

(三)青霉装片150

(四)青霉切片151

(五)曲霉装片152

(六)地衣切片152

(七)麦锈菌春孢子、夏孢子、冬孢子切片153

(八)伞蕈示担子及担孢子切片154

第十一章 植物学制片155

一、藻类155

(一)团藻、空球藻、实球藻、衣藻装片155

(二)衣藻示鞭毛装片156

(三)硅藻多种装片157

(四)水绵、双星藻、刚毛藻、间生藻、颤藻装片158

(五)轮藻示精子囊、卵囊装片159

(六)昆布示孢子囊切片160

二、苔藓类161

(一)钱苔精子器、颈卵器、孢子体纵切片161

(二)地钱精子器、颈卵器、孢芽杯纵切片、藓精子器、颈卵器、孢蒴纵切片162

三、蕨类163

(一)水韭示雄孢子囊、雌孢子囊纵切片163

(二)石松球果、卷柏球果纵切片164

(三)蕨叶示孢子囊群切片165

(四)蕨原叶体示精子器、颈卵器、孢子叶装片166

(五)槐叶孢子囊果纵切片167

四、被子植物167

(一)根167

(二)茎172

(三)叶180

(四)花183

(五)种子与果实187

第十二章 无脊椎动物学制片一、原生动物192

(一)变形虫装片192

(二)草履虫接合生殖装片193

(三)草履虫分裂生殖装片194

(四)眼虫装片195

(五)放射虫装片、有孔虫装片196

二、海绵动物197

(一)海绵骨针装片197

(二)毛壶横、纵切片198

(三)海绵芽孢装片199

三、腔肠动物199

(一)水螅整体装片、水螅附精巢、卵巢、芽体装片199

(二)水螅示神经细胞装片200

(三)水螅过精巢、卵巢横、纵切片201

(四)薮枝虫、筒螅装片201

四、扁形动物与线形动物202

(一)涡虫示消化系统装片202

(二)华枝睾吸虫、羊肝蛭、姜片虫装片203

(三)猪带绦虫囊尾蚴装片204

(五)日本血吸虫雌、雄成虫或交接装片、十二指肠钩虫、蛲虫装片205

(四)日本血吸虫尾蚴装片205

(六)蛔虫雄成虫、雌成虫横切片207

(七)寄生虫卵装片208

(八)旋毛虫装片209

五、轮虫动物与苔藓动物210

轮虫装片、淡水苔藓虫装片210

六、环形动物210

(一)沙蚕徒手切片210

(二)蚯蚓横切片211

七、节肢动物212

(一)蜜蜂口器、蜜蜂足装片212

(二)雌蚊口器拆解装片213

(四)昆虫复眼切片214

(三)昆虫复眼装片214

(五)人虱、跳蚤、臭虫装片215

第十三章 组织与胚胎学制片一、上皮组织216

(一)单层扁平上皮装片(硝酸银法)216

(二)单层立方上皮、单217

层柱状上皮、假复层上皮、复层扁平上皮、变移上皮切片217

二、结缔组织218

(一)疏松结缔组织平铺装片218

(二)疏松结缔组织台盼蓝染色法示吞噬细胞219

(三)胶原纤维、网状纤维220

(四)弹性纤维226

(五)发育骨、齿切片228

(六)骨、齿磨薄装片230

三、肌肉组织232

(一)平滑肌拆解分离装片232

(七)弹性软骨、纤维软骨、透明软骨切片232

(二)横纹肌横、纵切片233

(三)心脏肌切片234

四、神经组织235

(一)运动神经细胞235

(二)小脑示蒲金野氏细胞切片236

(三)神经原纤维237

(四)有髓神经239

(五)无髓神经240

(六)感觉神经末鞘示环层小体装片241

(七)运动神经终板装片241

(八)神经胶质242

五、神经系统与感觉器官246

(一)大脑与小脑皮质切片246

(二)脊神经节与交感神经节切片247

(三)眼球切片248

(四)耳蜗切片249

六、循环系统与淋巴器官250

(一)动静脉、淋巴结切片250

(二)脾、骨髓涂片Giem-sa氏染色法251

(三)血液涂片wright氏染色法251

(四)脾脏切片VanGiesom氏染色法252

七、消化系统与呼吸系统253

(一)胃、肠切片253

(二)肝切片255

(三)胰腺切片257

(四)气管分离装片示假分层柱状纤毛上皮258

(五)肺切片259

(一)肾脏血管注射切片260

八、泌尿系统与生殖系统260

(二)威斯尔(wicsel)氏肾上腺嗜铬细胞染色法261

(三)奥加塔-奥加塔(Ogata-Ogata)氏硝酸银法示嗜铬细胞261

(四)卵巢、输卵管、子宫、阴道切片;睾丸、输精管切片262

(五)精子涂片262

九、内分泌系统263

(一)甲状腺与甲状旁腺切片(Besley法)263

(二)脑下垂体切片(Se-vevringhaus法)264

十、人皮肤切片示毛囊265

十一、胚胎266

(一)蛙卵切片266

(二)鸡胚装片268

(三)鸡胚切片271

(四)鱼卵切片示早期胚胎发育271

(五)猪胚切片273

第十四章 组织化学制片277

一、无机物质277

(一)钙277

(二)钾278

(三)铁279

(四)钠281

(五)磷酸盐281

二、碳水化合物282

(一)淀粉282

(二)葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖盐酸苯肼法283

(三)菊糖水合氯醛法283

(四)糖元284

(五)纤维素288

(六)木质289

(七)果胶质290

三、蛋白质291

(一)曙红-苦味酸法291

(二)耶苏莫-奥托卡瓦(Yasuma-Otchi-kawa)氏法(1953)291

(三)偶联反应法(Dani-ell 1950)292

(四)坂口(Sakaguchi)反应法(Deitch1961)293

四、脂类294

(一)脂肪294

(二)脂肪酸295

(三)胆固醇296

(四)其它脂类297

(一)脱氧核糖核酸(简299

称DNA)299

五、核酸299

(二)核糖核酸(简称RNA)301

六、酶类303

(一)碱性磷酸酶(简称AKP)303

(二)三磷酸腺苷酶(简称ATPase)307

(三)酸性磷酸酶(简称ACP)309

(四)脂酶311

(五)过氧化酶313

(六)琥珀酸脱氢酶(简称SDH)315

主要参考文献317

附录1.常用缓冲液318

附录2.各种生理盐水323

附录3.长度、重量、容量325

附录4.药品英汉对照326

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