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第一章绪论1

一、引言1

二、体细胞遗传学的发展历史和植物体细胞遗传学的出现3

三、植物体细胞遗传学的研究范围和内容7

四、植物体细胞遗传学发展的展望11

第二章植物组织和细胞培养16

一、植物组织和细胞培养的发展历史16

(一)无菌操作20

二、植物组织和细胞培养的基本方法20

(二)培养基的营养成分22

(三)培养基的选择27

(四)培养的物理条件29

三、愈伤组织培养30

(一)愈伤组织的诱导30

(二)愈伤组织的生长和特征31

四、细胞悬浮培养33

(一)悬浮细胞系的建立33

(二)悬浮细胞的生长35

(三)单个细胞的培养37

(四)影响单细胞培养的因素39

五、细胞和组织的低温保存40

(一)细胞对低温的反应40

(二)影响细胞存活的因素41

第三章植物组织和细胞培养中的离体形态发生45

一、植物细胞全能性的表达45

二、植物的离体细胞分化和器官发生46

(一)细胞分化46

(二)器官发生48

(三)影响芽形成的因素50

(四)影响根形成的因素52

三、体细胞胚胎发生53

(一)体细胞胚胎发生的理论和实践意义54

(二)体细胞胚胎发生的两种方式56

(三)细胞胚性状态的获得、保持和表达57

(四)胚状体的个体发生和起源59

(五)胚状体诱导和发育中内外因子的相互作用60

四、单倍体的产生63

(一)花药培养64

(二)花粉培养68

(三)通过染色体加倍得到纯合二倍体的方法70

第四章植物原生质体的游离和培养75

一、原生质体技术是植物体细胞遗传学的基础75

二、原生质体游离技术的发展76

三、原生质体在遗传学和细胞生理学研究中的作用78

四、原生质体游离和提纯的方法80

(一)植物材料的来源81

(二)酶解去壁83

(三)渗透压的调节85

(四)原生质体的提纯86

五、原生质体的培养方法87

(一)液滴培养87

(二)琼脂平板培养87

(三)“供养者”原生质体培养88

(四)共培养法89

(五)其他方法89

(一)供体植物的生理状态90

六、影响原生质体游离和培养的因素90

(二)供体植物的基因型91

(三)酶和酶解过程92

(四)培养基和生长调节物质94

(五)培养条件96

七、单倍体原生质体的获得和培养97

(一)花粉原生质体的游离98

(二)花粉四分体和花粉母细胞原生质体的游离100

(一)形态和结构104

一、游离的原生质体的性质104

第五章植物原生质体的生长、分化和形态发生104

(二)生理生化活动106

(三)质膜的性质108

二、原生质体细胞壁的再生112

(一)细胞壁再生的一般特征112

(二)细胞壁合成的时间115

(三)细胞壁形成的结构研究116

(四)细胞壁形成中的合成活动118

三、细胞分裂和细胞团的形成119

四、原生质体的分化和植株再生124

一、植物体细胞杂交的意义136

第六章原生质体融合和体细胞杂交136

二、植物体细胞杂交的历史和概况138

三、诱导原生质体融合的方法142

(一)融合的一般特征142

(二)融合的方法143

四、杂种细胞的鉴别和筛选147

(一)融合产物147

(二)筛选方法的概述147

(三)利用遗传互补作用进行筛选149

(四)利用生理互补作用进行筛选152

(五)通过对亲本细胞的失活和杂种细胞生长能力的恢复进行选择153

(六)机械分离154

(七)其他分离方法155

五、植物体细胞杂交的应用156

(一)在遗传学分析中的应用156

(二)体细胞杂交的实践应用162

第七章细胞器和亚原生质体在体细胞遗传学中的用途170

一、目的170

二、细胞器的分离和转移173

(一)从原生质体分离细胞器的方法174

(二)原生质体摄入外源细胞器的途径和方法175

(三)细胞器的导入及其作用179

三、亚原生质体的分离及其用途183

(一)什么是亚原生质体183

(二)亚原生质体的制备方法184

(三)亚原生质体的用途及融合实验188

第八章植物细胞的转化:外源基因的直接导入193

一、导言193

二、原生质体摄入外源基因的途径和方法195

(一)多聚氨基酸法196

(二)磷酸钙—DNA共沉淀法197

(三)脂质体法198

(四)微注射法200

(五)电激法201

三、细胞摄入外源物质机制的初步探讨203

第九章植物细胞的转化:以Ti质粒作为基因载体207

一、土壤根癌农杆菌及Ti质粒207

二、Ti质粒的结构和功能209

(一)Ti质粒的基本结构209

(二)T-区DNA的特征213

(三)T-区DNA的转移和整合214

(四)中间载体的应用217

三、用Ti质粒转化植物细胞的途径218

(一)原生质体的转化218

(二)细菌-细胞共培养法220

四、外源基因的表达221

(一)外源基因表达的条件221

(二)非毒性Ti质粒的构建及转化细胞的植株再生224

五、结论和展望225

第十章植物细胞的转化:以植物病毒作为基因载体230

一、植物病毒作为基因载体的条件和选择230

(一)基本条件230

(二)病毒的选择232

(三)病毒载体与质粒载体的比较233

二、双链DNA病毒:CaMV235

(一)CaMV的结构和性质235

(二)CaMV作为基因载体的探索238

三、单链DNA病毒241

(一)概况242

四、单链RNA病毒242

(二)RNA病毒的复制和表达243

(三)RNA病毒作为基因载体的探索244

五、结论和展望245

第十一章植物体细胞变异和突变251

一、植物组织和细胞培养中的变异和突变251

二、植物体细胞无性系变异的产生253

(一)什么是体细胞无性系变异253

(二)培养细胞的遗传性变异255

(三)培养细胞的生理性变异260

三、植物体细胞变异和突变机制的探讨261

(一)关于变异性的来源261

(二)关于体细胞突变的遗传方式和稳定性262

(三)关于突变的“热点”263

(四)关于体细胞突变发生的机制264

四、体细胞无性系变异在实践中的意义265

五、生化突变体的筛选268

(一)植物细胞培养中的生化突变体268

(二)生化突变体的分离和鉴定269

(三)植物生化突变体的例子271

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