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目录1

上篇 微生物学及免疫学基本技术1

第一章 微生物学实验室工作基本知识 （任维国、朱毓兰、毕无邪）1

第一节 实验室规则1

第二节 实验室基本设备及常用仪器2

第三节 玻璃器材的规格及洗刷、包装、灭菌4

第四节 消毒及灭菌法6

第五节 微生物实验课准备的组织工作和注意事项14

一、染色原液的配制18

第一节 细菌的染色法18

第二章 细菌染色技术 （赵会先）18

二、染色标本的制备及染色步骤19

三、微生物实验室常用染色法20

（一）单染色法20

（二）革兰氏染色法21

（三）抗酸染色法22

（四）英膜染色法23

（五）芽胞染色法24

（六）白喉杆菌异染颗粒染色法25

（七）鞭毛染色法26

（八）螺旋体染色法27

（九）真菌染色法29

（十）细菌核质染色法29

（十一）细菌细胞壁染色法30

（十二）病毒、立克次氏体染色法31

（十三）血片染色法32

二、教学常用标本制备举例33

（一）葡萄球菌标本制备33

一、制备标本片应注意的基本原则33

第二节 微生物教学常用标本片制备33

（二）链球菌标本制备34

（三）杆菌和弧菌标本片制备34

（四）结核杆菌标本片制备34

（五）破伤风杆菌芽胞标本片制备34

（六）肉毒杆菌芽胞标本片制备34

（七）肺炎双球菌荚膜标本片制备34

（八）炭疽杆菌荚膜标本片制备34

（九）白喉杆菌异染颗粒标本片制备35

（十）吞噬现象标本片的制备35

（十一）真菌标本片制备36

第一节 培养基制备的一般技术37

第三章 细菌的培养技术 （朱毓兰、任维国）37

第二节 常用培养基的制备42

一、培养基种类42

二、常用培养基的制备43

1．蛋白胨水培养基43

2．肉膏汤培养基43

3．牛肉浸汤培养基44

4．肝浸汤培养基44

6．血清肉汤培养基45

7．普通琼脂培养基45

5．葡萄糖肉汤培养基45

8．血琼脂培养基46

9．巧克力培养基46

10．半固体琼脂培养基46

11．S—S琼脂培养基46

12．去氧胆盐柠檬酸盐琼脂培养基47

13．伊红美兰培养基47

14．双糖（含铁）培养基48

15．糖发酵管培养基48

16．尿素琼脂培养基49

19．吕氏（Loeffler）血清斜面培养基50

17．菊糖血清培养基50

18．明胶培养基50

20．亚碲酸钾（Potassiumtellurite）培养基51

21．艾立克（Elek）氏白喉杆菌毒力试验用培养基51

22．脱脂牛乳培养基52

23．紫牛乳培养基52

24．醋酸铅培养基52

25．硝酸盐培养基52

27．疱肉培养基53

28．罗氏（Lowenstein）培养基53

26．柯索夫（Korthof）培养基53

29．卵磷脂蛋黄素培养基54

30．3％氯化钠血琼脂培养基54

31．沙保弱（Sabouraud）氏培养基55

32．玉米面琼脂培养基55

33．硷性琼脂培养基56

34．艾（Avery）氏培养基56

35．博一姜（Bordet—Gengou）氏培养基56

36．威一布氏培养基57

37．枸橼酸盐琼脂培养基57

40．胡罗卜马铃薯琼脂培养基58

39．含硫堇及硷性复红培养基58

38．酒石酸盐培养基58

第三节 细菌的培养法59

一、各种培养基接种手技59

1．琼脂平板培养基划线接种技术59

2．斜面培养基接种技术59

3．半固体培养基穿刺接种技术59

4．液体培养基接种技术60

二、细菌培养法60

（一）一般培养法60

（二）厌氧培养法61

（三）CO2培养法62

第四章 动物接种技术 （朱毓兰）63

第一节 动物接种技术63

1．一般注意事项63

2．皮内接种法63

3．皮下接种法63

4．肌肉接种法63

5．家兔耳静脉接种法63

6．腹腔内接种法64

7．脑内接种法64

第二节 感染动物的观察65

8．家兔足掌皮内注射法65

第三节 动物采血技术66

1．家兔心脏采血法66

2．绵羊颈静脉采血法67

3．鸡心脏采血法68

4．家兔颈动脉放血法68

5．小牛（初生牛）颈动脉放血法69

第四节 常用动物解剖技术70

（一）琼脂双相扩散71

一、琼脂扩散71

第一节 琼脂扩散及电泳技术71

第五章 免疫学检查技术 （李静波、朱毓兰、毕无邪）71

（二）单相琼脂扩散72

二、电泳技术74

（一）琼脂平板区带电泳74

（二）免疫电泳75

（三）对流免疫电泳76

（四）火箭免疫电泳77

第二节 细胞免疫功能检查技术78

一、玫瑰花形成试验78

二、淋巴细胞转化试验80

三、硝基兰四氮唑还原试验82

第三节 免疫荧光技术83

一、荧光标记抗体的制备过程84

二、染色技术87

三、荧光显微镜检查87

［附］抗核抗体检查法89

第四节 免疫血清的制备90

一、免疫血清制备的一般原则90

（一）伤寒免疫血清的制备91

（二）痢疾免疫血清的制备91

二、常用免疫血清的制备91

（三）溶血素的制备92

（四）流行性感冒病毒免疫血清之制备93

（五）抗人血清的制备（包括全血清、丙球和IgG）94

第六章 微生物实验课前准备要点 （任维国、李静波、赵会先、毕无邪）96

一、显微镜的使用方法一观察细菌的形态结构96

二、细菌涂片标本的制备及单染色法97

三、革兰氏染色法97

四、细菌动力的观查98

五、细菌的生长现象99

七、色素抑菌试验100

六、紫外线杀菌试验100

八、细菌生化反应101

九、细菌的变异现象103

十、噬菌体特异性实验104

十一、噬菌斑实验104

十二、玻片凝集试验105

十三、试管（定量）凝集反应106

十四、环状沉淀反应108

十五、间接凝集反应108

十六、补体结合试验109

十七、动物过敏反应116

十八、脓汁分离培养一化脓菌系统实习之一117

十九、三种葡萄球菌及三种链球菌菌落—化脓菌系统实习之二118

二十、血浆凝固酶试验（玻片法）—化脓菌系统实习之三118

二十一、药物敏感试验（纸片法）—化脓菌系统实习之四119

二十二、胆汁溶菌试验120

二十三、脱氧核糖核酸酶（DNAse）产生试验121

二十四、粪便分离培养—肠道菌系统检查之一121

二十五、接种双糖（含铁）培养基—肠道菌系统检查之二122

二十六、玻片凝集（肠道菌的初步鉴定）—肠道菌系统检查之三122

（三）甲基红（MR）试验123

（二）枸缘酸盐利用试验123

（四）V—P试验123

二十七、分离细菌作生化反应及因子血清凝集试验（肠道菌的最后鉴定）肠道杆菌系统检查之四123

（一）尿素分解试验123

［附］生化反应123

二十八、厌氧芽胞杆菌血平板菌落124

二十九、破伤风毒力试验及抗毒素保护试验124

三十、产气荚膜杆菌动物试验—泡沫肝试验125

三十一、产气荚膜杆菌培养物126

三十二、卵磷脂酶试验126

三十三、肉毒杆菌动物试验126

三十四、需氧芽胞杆菌的鉴别127

三十五、抗酸染色——检查结核病人痰128

三十六、结核杆菌斜面培养物129

三十七、结核杆菌动物试验标本129

三十八、白喉杆菌的毒力测定130

（一）动物体内测定法130

（二）平板毒力测定法130

三十九、流感杆菌卫星现象131

四十、鼠疫杆菌培养标本131

（一）普通平板培养物—观查菌落131

（二）钟乳石状生长现象131

（一）硫化氢产生试验132

（三）鼠疫噬菌体试验132

四十一、布氏杆菌培养标本132

（二）色素抑制试验133

四十二、鸡胚培养法133

四十三、牛痘病毒感染鸡胚绒毛尿囊膜的病变134

四十四、流感病毒血凝及血凝抑制试验135

四十五、脑炎病毒小白鼠发病症状136

四十六、螺旋体暗视野检查137

四十七、真菌培养物138

四十八、真菌病材及各种结构镜下标本138

第一节 抗菌素敏感试验140

第七章 几项特殊技术 （任维国、毕无邪）140

第二节 病毒培养技术146

一、鸡胚培养法146

二、组织培养法151

第三节 噬菌体的分离技术156

第四节 菌（毒）种保存法158

第五节 致病真菌检查技术162

［附］常用溶液配制166

二、厚血片法170

一、薄血片法170

下篇 寄生虫学实验诊断技术170

第八章 血液中寄生虫的检查法 （陈敏生）170

第一节 疟原虫等血涂片的制备及染色法170

三、新鲜血片法171

四、未染色血片的保存法171

五、血涂片染色法171

瑞氏染液的配制及染色法171

吉氏染液的配制及染色法171

缓冲液的制备171

七、血片上染色液沉淀的矫正法172

六、疟原虫薄血片吖啶橙染色萤光镜检法172

第二节 丝虫的微丝蚴检查及染色法173

一、新鲜血片检查法173

二、厚血片染色检查法173

三、微丝蚴血涂片快速染色法173

四、微丝蚴浓集法174

五、用计算数池方法检查微丝蚴阳性率和密度174

表（5—29）班氏微丝蚴与马来微丝蚴区别要点174

第二节 国产染料“学生兰”和“枣红”配制肠道原虫染液迅速诊断法175

第一节 直接涂片法175

第九章 肠内原虫的检查法 （陈敏生）175

第三节 固定检查法176

第四节 对比染色永久片制作法177

第十章 内脏原虫检查法 （陈敏生）179

第一节 阴道滴虫染色检查法179

第二节 痰、肺、肝中痢疾阿米巴滋养体检查法179

第三节 脾、肝、骨髓中利什曼原虫及其它原虫检查法179

二、营养琼脂血清盐水培养基180

一、蛋血清培养基180

第一节 痢疾阿米巴培养及长期保种的方法180

第十一章 常用原虫培养法 （陈敏生）180

三、培养基的检查与转种181

第二节 杜氏利什曼原虫培养法及长期保种181

一、N、N、N、培养基181

二、杨氏培养基182

第三节 阴道滴虫无菌培养及长期保种的方法183

一、大豆蛋白胨培养基183

二、半胱氨酸—胨—肝—麦芽糖培养基183

一、直接涂片法184

常见寄生虫卵鉴别要点184

第十二章 蠕虫检查法 （陈敏生）184

第一节 虫卵检查法184

人体寄生虫卵（彩图）185

二、虫卵浓缩法185

（一）自然沉淀法185

（二）离心沉淀法185

（三）饱和盐水浮聚法185

（四）乙醚蚁醛法185

（五）汞醛碘法185

五、绦虫卵检查法186

第二节 虫卵保存法186

三、蛲虫卵检查法186

四、痰内肺吸虫卵检查法186

（六）尼龙袋集卵法186

第三节 虫卵计算法187

一、洪氏过滤改良计算法187

二、司氏稀释虫卵计算法187

三、虫卵计算法测定钩虫病感染度188

第四节 蠕虫幼虫检查法188

一、钩蚴孵化法188

痘猪肉检查法189

四、皮下囊尾蚴检查法189

猪、牛绦虫的囊虫头节孵出法189

二、蛔虫卵孵育法189

表毛蚴与原生动物鉴别特点189

三、日本血吸虫毛蚴孵化法189

五、绦虫孕卵节片检查法190

六、旋毛虫检查法190

第五节 蠕虫成虫的检查及固定、染色、制片法190

一、线虫检查与固定190

二、线虫迅速诊断透明法190

实验室常用胭脂红染液配制191

四、染色与封固191

三、吸虫固定法191

实验室常用苏木素染液配制192

第十三章 动物实验法 （陈敏生）193

第一节 原虫193

一、痢疾阿米巴原虫193

二、杜氏利什曼原虫193

第二节 蠕虫193

一、接种蛔虫卵获取幼虫法193

四、日本血吸虫194

〔附〕人工消化液配方194

二、卫氏并殖吸虫（肺吸虫）194

三、华枝睾吸虫（肝吸虫）194

第十四章 医学节肢动物的采集与保存 （王才）195

第一节 采集方法195

一、蚊195

二、白蛉195

五、虱196

七、蜱196

六、臭虫196

四、蚤196

三、蝇196

八、恙螨幼虫197

九、疥螨197

第二节 标本的制作与保存197

一、针插标本197

（一）制作前的处理197

（二）针插法197

（一）制作前的处理198

三、玻片标本制作法198

（二）固定198

二、浸渍标本198

（三）保存198

（一）浸渍前的处理198

（二）封片法199

第三节 几种饲养方法200

一、蚊200

二、白蛉200

三、蝇200

四、蚤200

二、白蛉201

三、解剖标本的制片201

（二）受精囊的解剖201

（一）口腔咽喉201

第四节 内部解剖201

（二）胃肠的解剖201

（一）唾液线的解剖201

一、蚊201

五、蜱201

第十五章 免疫诊断技术202

第一节 间接血球凝集试验 （连建安）202

第二节 蚊虫胃血测定的对流免疫电泳法 （刘兆铭）205