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目录1

前言1

第一编 动物显微制片技术2

第一章实验须知2

第一节 实验室规则2

第二节 玻璃器皿的清洁3

一、 玻璃器皿的洗涤3

（一）普通洗涤3

（二） 化学洗涤3

一、 载玻片的规格和厚度4

第三节 载玻片和盖玻片4

二、 玻璃器皿的干燥4

二、 盖玻片的规格和厚度5

三、 载玻片和盖玻片的清洁5

四、 旧载玻片和盖玻片的利用5

第四节 天平6

一、 药物天平6

二、 扭力天平7

三、 分析天平7

第五节 试剂和溶液8

一、 化学试剂的规格与分类8

2、 克分子溶液10

1、 百分比浓度（％）10

二、 溶液的浓度10

（一） 溶液浓度的表示方法10

3、 当量溶液11

（二） 酒精稀释法12

三、 一般溶液的配制方法12

四、 缓冲溶液12

（一） 缓冲溶液的作用、原理13

（二） 常用的缓冲溶液及其配材（见附录四）13

（三） 几种生理盐水的配制（见附录五）13

一、 非切片法14

二、 切片法14

第一节 动物显微制片法的分类14

第二章动物显微制片技术概述14

第二节 切片法的一般步骤15

一、 杀死、取材与固定15

二、 洗涤15

三、 脱水15

四、透明15

五、 透入15

十、封藏16

九、染色16

六、 包埋16

七、 切片16

八、贴片16

第三章切片技术原理与方法17

第一节 动物杀死的方法17

第二节 取材17

一、 取材的方法17

二、 取材的注意事项18

第三节 固定和固定液18

一、 固定的作用和目的18

三、 固定液作用的方法19

二、 组成固定液的条件19

四、 固定液的限制20

五、 固定的注意事项20

六、 固定液的种类和性能21

（一） 简单固定液21

1、甲醛21

2、 乙醇（酒精）22

3、 醋酸22

4、 苦味酸22

6、 重铬酸钾23

5、 铬酸23

7、 氯化汞24

8、 四氧化锇25

（二） 混合固定液25

1、 津克氏液26

2、 霍兰德—波恩氏液26

3、 黑利氏液26

4、 切姆比氏液27

5、 弗列明氏液27

8、 阿特曼氏液（之一）28

9、 阿特曼氏液（之二）28

7、 旦方诺氏液28

6、 雷戈德氏液28

10、 卡诺伊氏液29

第四节 洗涤29

一、 洗涤的目的29

二、 洗涤的原则29

三、 洗涤的方法30

第五节 脱水30

一、 脱水的目的30

四、 常用的脱水剂及使用的注意事项31

2、 脱水兼石蜡溶剂的脱水剂31

（二）丙酮31

（一）乙醇（酒精）31

三、 脱水剂的类型31

二、 脱水的方法31

1、 非石蜡溶剂的脱水剂31

（三） 正丁醇32

（四） 叔丁醇32

（五） 环已酮32

（六） 二氧陆？32

第六节 透明32

一、 透明的目的32

（四） 氯仿33

（六）松酯醇33

（五） 香柏油33

（二） 甲苯33

（三） 苯33

（一） 二甲苯33

二、 常用的透明剂33

第七节 透入与包埋34

一、 透入与包埋的目的34

二、 包埋剂（支持剂）34

（一）石蜡34

四、 石蜡透入的操作35

（三） 双重法35

（二） 挥发法35

（一） 熔化法35

（三） 炭蜡35

（二）火棉胶35

三、 包埋方法的种类35

五、 包埋36

（一） 包埋的用具36

（二） 包埋的操作37

（三） 包埋中出现的问题及原因37

（一） 石蜡块的固着38

（二） 修块38

（三） 磨刀38

一、 切片前的准备工作38

第八节 切片38

二、 切片机40

三、 石蜡切片的操作40

四、 切片过程出现的问题及其解决办法44

第九节 贴片45

一、 贴片的用具45

二、 贴片的方法46

第十节 染料47

一、 染料的分类47

（一）天然染料47

（二）人工染料47

（1）光的吸收和颜色48

2、发色团产生颜色的机制48

（2）有机化学物的价键结构和光的吸收48

二、 染料必须具备的条件48

（一）发色团48

三、 染料的化学结构特点48

1、染料产生颜色的原因48

（二）助色团51

1、酸性助色团及其作用52

2、碱性助色团及其作用53

四、 酸性染料和碱性染料55

五、 常用的染料的性质及其配制55

（1）海登汉氏铁苏木素56

（2）哈里斯氏苏木素56

1、苏木素（苏木精）56

（一）天然染料56

（3）埃利希氏苏木素57

（4）卡拉基氏（Carrazzi′s）苏木素（汪德耀改良）58

2、洋红58

（1）硼砂洋红58

（2）明矾洋红59

（3）醋酸洋红59

（二）人工染料59

（一）染色的物理作用62

二、 染色的理论62

第十一节 染色62

一、 染色的目的62

（二）染色的化学作用63

三、 细胞的染色63

（一）细胞核的染色63

1、细胞核的成分63

2、核的染色64

（1）核仁的染色64

（3）核质的染色65

（二）细胞质的染色65

（2）染色体的染色65

（三）细胞器的染色66

1、线粒体的染色66

2、高尔基体的浸染66

（1）四氧化锇的浸染66

（2）硝酸银的浸染67

四、 染色的方法68

（一）整体染色法68

（二）组织块染法68

（三）蜡带染色法68

（四）切片染色法68

六、 染色的一般注意事项69

五、 切片染色法的操作步骤69

（五）特殊染色法69

第十二节 媒染70

一、 媒染染料和媒染剂70

（一）媒染染料70

（二）媒染剂71

二、 媒染的机理71

二、 分化的原理73

三、 分化剂的种类73

一、 分化的目的73

第十三节 分化73

第十四节 封藏74

一、 封藏的目的74

二、 封藏剂的选择74

三、 常用的封藏剂75

（一）湿性封藏剂75

（二）干性封藏剂75

第十五节 石蜡切片技术操作程序及时间表75

第十六节 石蜡切片法实例76

一、 细胞形态染色76

（一）海登汉铁矾苏木素染色法76

（一）阿特曼染色法78

二、 细胞器染色78

（二）高尔基体浸染法79

三、细胞化学染色80

（一）孚尔根反应80

（二）布拉舍反应82

（三）脱氧核糖核酸（DNA）、多糖、83

蛋白质的三色染色法83

（四）显示酸性磷酸酶的细胞化学法85

（五）糖类的显示方法—PAS反应86

（McManus,1946）86

（六）脂类的显示方法88

（七）蛋白质的显示方法——？绿染色92

法显示细胞的碱性蛋白及酸性蛋白92

第十七节 火棉胶切片法93

一、 火棉胶切片法原理93

二、 火棉胶切片法的操作93

第十八节 冰冻切片法94

一、 取材94

二、 固定95

三、 切片95

第十九节 特殊包埋法97

一、 碳蜡包埋法97

二、 双包埋法98

三、 明胶包理法99

第四章 非切片技术的原理与方法100

第一节 整体制片法100

一、 暂时和半永久性制片法100

（一）甘油法100

（二）甘油明胶法100

（三）乳酸一苯酚法101

二、 永久性整体制片法102

三、 整体制片实例（水蚤的整体制片）102

第二节 涂布法103

第三节 压碎法105

第四节 伸展法107

第五节 磨片法108

第五章 活体染色110

第一节 活体染色的定义及分类110

第二节 活体染色技术111

第三节 活体染色的机制113

第二编 显微镜术及显微摄影术117

第六章 显微镜117

第一节 普通显微镜117

一、 显微镜的组成117

（一）物镜119

二、 几种重要的部件119

（二）目镜122

（三）聚光器123

三、显微镜操作中几种重要的调节方法123

（一）光路合轴调节123

（二）聚光器的调中124

（三）光阑的调节124

第二节 相差显微镜124

一、 相差显微镜的用途124

二、 原理124

（一）环状光阑127

三、 主要构造127

（二）相板128

（三）合轴调中望远镜129

（四）滤色片129

（五）相差显微镜的光路图129

四、 操作131

五、 注意事项131

（一）相差物镜的选择131

（二）盖玻片和载玻片131

（三）染色132

（一）镜台测微计133

一、 显微量尺的种类133

（二）目镜测微计133

第七章 显微镜附件的使用133

第一节 显微镜量尺的使用133

（三）镜台标本移动器的游标尺135

（四）微调焦轮上的标尺136

二、测量方法136

（一）注意事项136

（二）长度测量136

（三）厚度测量137

（四）数量计算138

第二节 描绘器的使用139

一、 OLYM PUS BH 2—DA型描绘器139

（一）显微镜的选择141

（二）物镜的选择141

第八章显微摄影术141

一、 显微镜141

第一节 显微摄影装置及操作141

（三）目镜的选择142

（四）物镜与目镜的组合142

（五）光阑的使用142

二、 照明装置144

三、 照相装置144

（一）海鸥牌ZA显微照相器的使用144

相装置的使用145

（二）OLYMPUS BHS 系列显微镜的PM-10AD型照145

一、 滤色片的原理151

第二节 滤色片的使用151

二、 选用滤色片的原则153

（一）黑白摄影中滤色片的选用153

（二）彩色摄影中滤色片的选用153

第三节 感光材料156

一、 底片156

（一）底片的结构和性能156

（二）底片的种类157

（三）底片的感光速度158

（一）相纸的结构159

（四）底片的反差159

二、 相纸159

（二）相纸的种类160

（三）相纸的性能及表示法160

第四节 暗房技术161

一、 曝光过程底片潜影的产生162

二、 显影163

（一）显影液的组成成分及其作用原理163

（二）常用显影液的配方164

（三）显影的操作165

（一）定影液的成分及作用167

四、 定影167

三、 停影167

（二）定影液的配方168

（三）定影过程中的注意事项168

五、水洗169

六、 晾干169

七、 晒印及放大技术169

（一）晒印169

（二）放大170

（一）翻摄用照相机171

（三）附加镜171

（二）翻摄用镜头171

一、 翻摄基本设备171

第五节 翻摄技术171

（四）翻摄装置173

（五）翻摄用感光片的选择173

二、翻摄的照明、调焦与曝光173

三、翻摄底片的冲洗174

第六节 黑白感光幻灯片基本制作技术175

一、 底片印相175

二、 底片放大176

三、 感光片的冲洗176

（一）显影176

四、 黑白反转冲洗法177

（二）定影和水洗177

附录：180

一、常用的用具、药品和染料180

二、度量衡表186

三、常用的配方187

四、缓冲溶液189

五、各种培养液199

六、几种常用生物染料的光谱吸收201

七、细胞核染色剂（碱性染料）202

八、细胞质染色剂（酸性染料）202

十、活体染色剂204

九、脂肪染色剂204

十一、甲基绿的提纯方法205

十二、中性甲醛的配制205

十三、封片剂205

十四、光学显微镜切片中几种药剂的脱除方法206

十五、几种试剂1N溶液的配制208

十六、十进位数量词头及符号表209

十七、动物组织软化的方法209

十八、软体动物麻醉法210

十九、特殊包埋、切片方法212

二十、显微镜的主要组件使用不妥所产生的现象及纠正措施215

主要参考书218