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上篇 基础理论1

1 哺乳动物的精子1

1.1 精子的发生1

1.2 附睾内精子的贮存和成熟6

1.3 精子的形态结构8

1.4 精子的化学组成及分子构型15

1.5 雌性生殖道内的精子17

1.6 异常精子和不育19

2 哺乳动物的卵子24

2.1 卵子的形成24

2.2 排卵27

2.3 卵子成熟发育中的基因活动和蛋白质合成30

2.4 卵母细胞成熟发育的调控35

2.5 卵母细胞与卵丘细胞间的关系39

2.6 卵子的一般形态构造41

2.7 卵子的超微结构44

2.8 卵子的老化和异常51

2.9 卵子的孤雌生殖52

3 哺乳动物的受精57

3.1 精子的获能及其变化57

3.2 精子的顶体反应61

3.3 精子的穿卵68

3.4 精卵融合75

3.5 精卵融合后的反应80

4 哺乳动物的早期胚胎发育85

4.1 胚胎的早期发育85

4.2 早期胚胎的细胞分化90

4.3 早期胚胎发育中基因的表达98

4.4 早期胚胎发育中的酶活动100

4.5 早期胚胎的死亡和免疫性丢失101

4.6 胚胎与母体间的相互关系103

4.7 早期胚胎发育的内环境105

5 哺乳动物卵母细胞和胚胎保存112

5.1 卵母细胞和胚胎保存的意义112

5.2 卵母细胞和胚胎的低温保存113

5.3 超低温保存的原理116

5.4 卵母细胞的超低温保存121

5.5 胚胎的超低温冷冻125

6 哺乳动物胚胎移植及分割130

6.1 胚胎移植研究简史130

6.2 胚胎移植的意义132

6.3 胚胎移植的生理学基础134

6.4 胚胎移植的原则及条件135

6.5 胚胎移植的基本技术程序137

6.6 胚胎移植的效果和发展前景140

6.7 胚胎分割142

7 哺乳动物的体外受精146

7.1 体外受精的历史和现状146

7.2 卵母细胞的体外成熟149

7.3 影响卵母细胞体外成熟的因素152

7.4 精子的体外获能156

7.5 卵母细胞的体外受精158

7.6 精子的显微注射161

7.7 体外受精胚胎的发育163

7.8 体外受精的应用前景166

8 哺乳动物性别控制169

8.1 性别控制的发展历史169

8.2 性别决定理论170

8.3 精子的性别控制171

8.4 胚胎的性别控制174

8.5 结论179

9 哺乳动物嵌合体181

9.1 嵌合体的研究历史181

9.2 嵌合体的标记182

9.3 嵌合体的制作方法183

9.4 嵌合体制作的局限性185

9.5 嵌合体研究的现状186

9.6 嵌合体的应用188

10 哺乳动物胚胎细胞核移植191

10.1 核移植的原理和意义191

10.2 核移植的历史和现状192

10.3 核移植技术程序194

10.4 核移植中细胞核的构建和活化198

10.5 影响核移植的因素199

10.6 核移植技术的应用和前景203

11 哺乳动物转基因207

11.1 转基因的历史发展207

11.2 转基因的方法209

11.3 外源基因的整合215

11.4 外源基因的表达217

11.5 转基因的生理效应与遗传221

11.6 基因转移的鉴定223

11.7 转基因技术的应用和前景223

11.8 转基因存在的困难和问题228

11.9 转基因技术今后急待解决的问题233

12 哺乳动物胚胎干细胞235

12.1 ES细胞的生物学特性235

12.2 ES细胞与胚胎细胞的关系237

12.3 ES细胞系的建立方法237

12.4 ES细胞研究的现状和问题239

12.5 ES细胞的应用和前景241

下篇 实验技术245

13 哺乳动物配子和胚胎的细胞学技术245

13.1 精子的光学显微镜观察245

13.2 卵子和胚胎的染色体检查249

13.3 精子的电子显微镜观察251

13.4 卵子和胚胎的电子显微镜观察252

13.5 配子和胚胎的电镜细胞化学技术253

13.6 胚胎的银染和放射自显影技术256

13.7 配子和胚胎的免疫电镜技术257

14 哺乳动物卵子和胚胎的分子生物学技术258

14.1 卵子和胚胎的核酸分离258

14.2 卵子和胚胎的电泳技术260

14.3 卵子和胚胎的cDNA文库构建264

15 哺乳动物胎胚工程应用技术274

15.1 配子和胚胎的冷冻保存274

15.2 胚胎的分割278

15.3 胚胎嵌合280

15.4 胚胎性别鉴定282

15.5 体外受精284

15.6 转基因动物的制作288

15.7 小鼠胚胎的细胞核移植292

15.8 小鼠胚胎干细胞的分离培养296

附录299

附录1 电镜样品制备常用溶液299

附录2 组织培养常用试剂的配制306

附录3 几种生理盐溶液320