《哺乳动物的发育工程》求取 ⇩

目 录1

前言1

1早期胚胎的培养方法4

§1.1试管内受精和早期胚胎培养4

1．研究小史6

2．实验操作上的要点8

3．遗传上完全纯合型小鼠制作技术的展望10

3．小鼠以外的其他动物14

1．体外受精15

§1.2体外受精和早期胚胎培养15

2．早期胚胎的培养22

§1.3早期发育中的基因作用27

1．卵子发育和精子形成27

2．受精，卵裂及胚泡形成29

3．着床及着床后的胚胎发育31

2 哺乳动物胚胎内基因导入和实验操作34

§2.1小鼠胚胎内的基因导入（总论）34

1．小鼠胚胎内外源基因导入技术35

1．用显微注射法把基因导入小鼠早期胚胎36

§2.2小鼠胚胎内基因导入的技术36

2．小鼠卵细胞上作显微注射的设备37

§2.3外源基因导入哺乳动物体细胞44

1．研究的目的44

2．把外源基因导入细胞的种种方法45

3．用红血球血影融合法转移DNA47

4．显微注射和扎刺（pricking）法48

§2.4动物细胞内基因的导入和表达52

1．用代谢上有选择标记的DNA作性状转化53

2．导入基因的回收54

3．用基因导入法解析丝蛋白基因的转录机构55

4．绢丝腺细胞内丝蛋白基因的显微注射61

§2.5哺乳动物细胞内σ-晶体蛋白基因的导入和表达63

1．δ－晶体蛋白基因63

2．基因导入方法的商讨63

3．小鼠水晶体上皮细胞中注入的δ－晶体蛋白基因的表达64

4．基因表达的组织特异性65

5．担负组织特异性的DNA区域66

6．细胞方面的条件68

§2.6小鼠受精卵中外源基因的导入69

1．作为重组DNA的实验需要提出申请69

2．外源基因的导入技术70

3．以往报告的归纳73

3核移植和染色体组操作76

§3.1对小鼠受精卵作核移植76

1．胚胎细胞核的全能性78

2．受精卵细胞质使核活化和早期变化81

3．核移植的新方法83

1．核移植85

§3.2核移植以及细胞融合中细胞核的构建和活化85

2．异核体（heterokaryon）89

3．杂种细胞以及重建细胞的核93

§3.3用除去前核的方法作成遗传上完全纯合型小鼠97

1．实验设备和器具98

2．实验操作100

§3.4应用早期胚胎的显微手术作出哺乳动物一卵性103

多生仔的实验103

1用2～8细胞期胚胎的实验104

2．用桑椹期胚胎～胚泡做的实验108

3．制作一卵性多仔实验的问题及展望114

§3.5哺乳动物自发的单性发育116

1．不会出生的自发单性发育胚胎118

2．自发单性发育胚？正常胚胎之间的嵌合体119

3．把自发单性发育胚的核注入到去核受精卵中120

4．子宫外组织环境下的自发单性发育胚：畸胎瘤的形成121

5．单性发育胚胎的发育工程在应用上的展望122

1．老化的程序学说123

§3.6老化和染色体组异常123

2．一生过程和细胞中产生的异常124

3．老化的遗传背景126

4．老化和遗传性疾病126

5．一生中生殖细胞数目的变化127

6．卵巢和卵母细胞的加龄128

7．生殖和加龄129

8．老化和染色体组操作的可能性130

1．小鼠的准备132

§4.1小鼠嵌合体132

4嵌合体132

2．器具和培养液的准备134

3．早期胚的采取138

4．胚的联结和培养139

§4.2大鼠嵌合体140

1．大鼠和小鼠的不同点140

2．大鼠嵌合体制作方法141

3．大鼠嵌合体及其应用例子145

§4.3异种胚之间嵌合体145

1．异种胚嵌合体制作法146

2．大鼠？小鼠之间嵌合体胚胎148

3．小鼠？豚鼠间嵌合体胚胎151

4．Mus caroli？Mus musculus嵌合体152

§4.4畸胎瘤细胞注入嵌合体153

1．畸胎瘤的诱发和它的性质154

2．胚泡内畸胎瘤细胞的注入155

4．畸胎瘤细胞与细胞工程的研究156

3．假孕母体内的胚泡移植156

5．作为注入嵌合体材料的畸胎瘤干细胞的将来及问题点159

§4.5畸胎瘤细胞聚合嵌合体160

1．用聚合法作成嵌合体胚—到胚泡形成161

2．用聚合法作成嵌合体小鼠165

§4.6嵌合体和神经发育167

1．神经系统的发育168

2．大脑皮质形成机构的解析172

3．小脑的组织发育175

4．网膜的形成178

5．髓鞘形成180

§4.7嵌合体与肿瘤发生183

1．小鼠的卵巢性畸胎瘤特征184

2．材料及方法186

3．结果及考察187

§4.8嵌合体和免疫识别190

1．血液型嵌合体191

2．自体耐受的机构与嵌合体192

3．自体耐受的复杂性193

5．MHC控制和嵌合体动物194

4．T细胞的抗原识别与MHC控制194

6．MHC控制与MHC耐受199

§4.9嵌合体与T/t基因座位200

1．T/t基因座位200

2．用嵌合体解析T/t基因的机能203

5着床和胎盘215

§5.1受精卵的分化与着床前的动态215

1．哺乳动物受精卵的形态学特征215

2．受精卵的代谢219

3．细胞分化221

4．受精卵着床前的动态222

§5.2着床和胎盘224

1．滋养层细胞－胚上皮细胞间的细胞联结225

2．对异种胚着床的母体免疫系统的反应229

3．在着床部位的巨噬细胞的动态231

4．局部的免疫机构与间膜腺233

6 后期胚胎的全胚培养和实验操作235

§6.1从着床前到早期体节期的胚胎培养235

1．从着床前开始的小鼠胚胎培养法236

2．小鼠胚胎在体外的发育238

3．从着床前开始的其他动物的胚胎培养240

4．从着床前开始的胚胎培养技术的应用240

§6.2器官形成期的全胚培养和培养下的胎仔操作241

1．培养法243

2．胎仔培养法的应用249

7胎仔组织的移植256

§7.1无胸腺裸鼠内人胎儿组织的移植256

1．无胸腺裸小鼠开发以前的历史257

2．人胎儿组织／无胸腺裸小鼠体系中得到的知识258

3．人胎儿组织移植实验的将来260

§7.2上皮、间充织相互作用与致癌——特别在消化262

系统中262

1．癌的发生机构262

2．上皮、间充织相互作用264

3．致癌与上皮、间充织相互作用268

§7.3胎仔实验手术273

1．胎仔实验手术的目的273

2．胎仔手术的进展273

3．笔者等胎仔手术的经验275