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第一篇 绪 论3

第一章哺乳动物的精子3

第一节引 言3

第二节精子的构造和功能3

一、 精子头部3

目 录3

二、精子尾部4

三、原生质膜4

二、睾丸精子5

第三节精子的生存环境和生理5

一、受精前精子5

三、附睾精子6

四、射出精子6

五、雌性生殖道内精子7

第二章哺乳动物的卵子9

第一节 引 言9

一、 卵子形成10

二、卵子的大小10

第三节卵子的形成和排卵10

第二节卵子的形态10

一、一般形态（基本构造）10

二、 卵泡的发育（卵子的发育和卵泡12

的关系）12

三、排卵13

第四节卵子的构造及其组成14

卵子的微细构造和细胞器14

第五节卵子的生理17

一、卵子的物质通透性17

三、卵子的代谢18

二、 卵细胞膜的性质和机能18

第二篇 基本操作21

第一章配子处理的准备工作21

第一节引言21

第二节处理配子的必须条件21

一、无菌操作的必要性21

二、环境条件的要求21

第二章处理配子必要的实验室、设备和器具23

第一节实验室的功能和构造23

四、培养室24

三、培养准备室24

第二节实验器具24

一、用于培养室内的器具24

解剖及手术室24

二、洗涤室、实验小动物24

一、更衣室24

二、用于培养室外的器具26

三、玻璃器具类28

四、塑料器具类29

五、其它器具、器材类29

第二节器具的洗涤30

第一节仪器的检查和调试30

第三章实验的准备30

第三节器具的包装31

第四节器具的消毒32

一、高压蒸汽灭菌法32

二、气体灭菌法33

三、干热灭菌法33

四、培养液的灭菌33

一、试剂的种类35

二、试剂的配制35

第二节试剂35

一、表面皿的硅化35

第三节操作方法35

一、设备35

第一节设备、器具35

第四章器具硅化法35

二、 器具、器材35

二、 处理卵子用毛细玻璃吸管的硅36

化法36

三、 注入用毛细吸管的硅化法36

四、洗涤和灭菌36

第五章培养液配制法和血清处理法37

第一节引 言37

第二节无机盐类溶液37

一、配制盐类溶液必要的器具、器材37

二、配制方法37

材38

二、培养液配制法38

第三节粉末培养液38

一、配制粉末培养液必要的器具、器38

第四节液体培养基39

第五节特殊培养基39

第六节血清39

一、血清购入和质量鉴定39

二、血清的灭活39

三、灭活血清的保存40

第七节用于精子、卵子实验的培养基40

的组成40

一、采取精液用器具和设备43

第一节处理精液的特殊器具和设备43

第一章精液和精子43

第三篇 基本技术篇〔1〕 精子43

二、精液的处理、检查和保存用器材44

和设备44

三、 其它45

第二节采精45

一、假阴道法46

二、 电采精法47

三、用于分析的精液48

二、用于受精的精液48

一、用于一般性状检查的精液……48

第三节精液的处理48

第四节精液的保存50

一、家畜精液的液态保存50

二、家畜精液的冷冻保存52

第二章精子实验57

第一节精子的获能法57

一、 自然交配法57

二、离体子宫内孵育法58

三、完全合成培养基内法59

一、 仓鼠精子向去除透明带的60

卵子的侵入能60

第二节精子获能判定法60

二、精子活力评定法63

第三节精子的顶体反应（三重染色法）65

一、设备、器具65

二、试剂65

三、操作方法66

第四篇 基本技术篇〔2〕 卵子71

第一章采卵法71

第一节采卵前的诱导排卵71

一、 各实验动物的超数排卵诱导法71

二、 各实验动物诱导排卵法72

第二节 处理卵子的器具、器材和试剂73

的准备73

一、 设备、器具73

二、试剂74

第三节采卵方法74

一、输卵管内采卵74

二、子宫内采卵78

三、卵泡内采卵80

第四节输卵管、子宫内分裂卵的阴道81

回收法81

三、操作方法82

二、阴道冲洗液82

一、设备、器具82

四、阴道冲洗采卵示例85

第五节牛受精卵的回收86

一、 用于牛子宫冲洗的冲卵器种类87

和操作方法87

二、 受精卵回收的实际操作方法…88

第二章卵子的检查法——正常性和发育能力的判定94

第一节 引 言94

第二节判定标准94

第三节卵子的分类95

第四节检查卵子时的注意点96

第三章卵子的保存110

第一节引言110

第二节冷冻、解冻方法概要110

一、装置、器具110

二、 冷冻液111

三、 植冰（ice seeding）111

第三节冷冻、解冻实际操作112

一、小鼠、大鼠112

二、 牛114

二、 Vitrification法115

一、甘油十蔗糖法115

第四节冷冻操作新技术115

第四章卵子培养法116

第一节引言116

第二节卵子体外培养116

第三节Brinster氏操作方法116

一、设备、器具116

二、试剂117

三、培养步骤119

第一节实验小动物的胚胎移植……121

一、 设备、器具121

第五章胚胎移植法121

二、 试剂122

三、操作方法123

第二节草食家畜胚胎移植127

一、手术胚胎移植法127

二、非手术胚胎移植法132

第三节猪胚胎移植134

一、设备、器具134

二、试剂135

三、操作方法135

二、试剂140

一、装置、器具140

第二节卵子全形封片法判断核相…140

第六章卵子核相判定法140

第一节引 言140

三、操作方法141

第七章免疫手术法——内细胞团分离法143

第一节引 言143

第二节抗体制作方法143

一、装置、器具143

二、试剂143

三、 动物144

四、操作方法144

二、试剂146

三、操作方法146

第三节抗体效价测定法146

一、 装置、器具146

四、说明148

第四节免疫手术法148

（内细胞团分离法）148

一、装置、器具148

二、试剂148

三、操作方法148

一、一般组织标本152

第二节光学显微镜标本制作法152

第一节引 言152

第八章卵子组织学152

二、组织化学标本153

三、免疫组织化学标本156

第三节 电子显微镜标本制作法……157

一、透射式电子显微镜标本制作…157

二、扫描电子显微镜标本制作……159

三、 电子显微镜组织化学标本制作160

一、 装置、器具165

第二节小鼠卵子的体外成熟165

第一节引 言165

第一章卵子体外成熟165

第五篇 应用技术165

二、试剂166

三、培养基配制166

四、 动物166

五、培养方法166

六、卵子的检查167

七、 结果168

八、存在问题168

二、 培养基169

一、装置、器具169

第二章体外受精法169

第一节实验小动物169

三、体外受精步骤170

四、检查171

五、体外胚胎的培养171

六、体外胚胎的移植171

七、 小鼠以外实验动物的体外受精172

第二节家畜172

一、 引言172

二、 体外受精用成熟卵子的准备…172

三、 获得受精能精子的准备176

养177

四、 卵子体外受精及其后的发育培177

五、卵子的标本制作法179

第三章胚胎分割生产双生仔181

第一节 引 言181

第二节分割的胚胎在活体内培养法181

一、装置、器具181

二、试剂182

三、操作方法182

第三节胚胎分割法184

二、试剂187

一、 装置、器具187

第一节 引 言187

第二节人工嵌合体动物的制作法…187

第四章卵子聚合法制作嵌合体胚胎和个体187

三、动物188

四、操作方法188

第五章多倍体胚胎制作法191

第一节 引 言191

第二节二倍体单性发育胚及体外191

受精法制作三倍体胚胎法191

一、设备、器具191

四、操作方法192

三、 动物192

二、试剂192

第三节卵裂球电融合法制作多倍体196

一、 设备、器具196

二、 试剂197

三、操作方法197

第六章利用H-Y抗体进行胚胎性别鉴别200

第一节引言200

第二节大鼠H-Y抗体的制作200

和部分精制法200

一、设备、器具200

二、试剂201

三、操作方法202

第三节 H-Y抗体效价的尾上皮细胞202

的细胞损害检查法202

一、装置、器具203

二、试剂203

三、操作方法203

第四节H-Y抗体鉴别胚胎性别的操205

作法205

一、设备、器具205

二、 试剂205

三、操作方法206

第七章染色体解析和基因表达机构的分析208

第一节引言208

第二节染色体解析208

一、 设备、器具208

二、试剂208

三、操作方法209

第三节X染色体的活性变化214

一、细胞遗传学方法214

二、生物化学方法216

一、设备、器具218

第三节显微注入法的实践218

第一节引 言218

第八章卵子显微注入法218

第二节显微注入法的基本事项218

二、试剂220

三、器具的制作和调试220

四、注入操作法222

五、处理卵子的培养224

六、处理卵子的移植224

注入法225

例2．牛卵原核显微注入法225

例1．将牛精子头部向体外成熟卵的225

第九章外源基因导入的基本操作法227

第一节研究现状227

第二节mRNA的分离法228

一、设备、器具229

二、试剂229

三、操作方法230

第三节cDNA的合成和纯株培养…232

一、 设备、器具233

二、试剂和酶类233

三、操作方法234

克隆的32P标记法238

第四节mRNA和cDNA238

一、mRNA32P－标记法239

二、 cDNA克隆切口转译的32P－标记240

法240

第五节基因文库的筛选241

用重组DNA实验制作导入重组分子的动物个时的物理性封锁方法的见解242

第二节 细胞的排列和分化解析法…243

一、设备、器具243

二、试剂243

第一节引 言243

第十章发育机制解析法243

三、操作方法244

第十一章药效试验的应用247

第一节引 言247

第二节染色体标本制作方法248

一、设备、器具248

二、试剂248

三、操作方法249

和受精培养基257

三、精子受精能获得培养基257

一、用于精子的各种溶液257

二、用于卵子的各种溶液257

第一章用于精子、卵子实验的各种溶液、培养液的组成257

第六篇 资料篇257

第一节一览表257

四、卵子发育培养基258

五、 用于细胞培养的溶液258

第二节各种溶液、培养液的组成……259

第二章特殊试剂、药物、器材、器具的购置地址273

第三章精子、卵子资料276

第一节一览表276

第二节一览表内容277

一、性机能资料282

三、精液和精子资料287

二、 副性腺分泌液的化学成分……287

四、卵子资料290

第四章名词解释299

第五章其他312

一、离心机的半径、离心力、旋转速度一览表312

二、各种资料记录表格313

三、 处理哺乳动物配子最低限度的设施、设备、器材和器具类317

四、实验动物处理方法参考书318

参考文献319

索引328

常用缩写生化词汇337

跋339