《表1 Real-time PCR引物序列[3]Tab.1 Primer sequence for Real-time PCR.》

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《低氧对人牙周膜干细胞增殖和分化的影响》

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收集在低氧以及常氧环境中培养了1和5d的hPDLSCs，Trizol提取总RNA。取1μg总RNA进行逆转录获得cDNA，用SYBR Green荧光定量PCR检测试剂盒进行Real-time PCR。以β-肌动蛋白（β-actin）为内参。95℃10min变性后，按照以下程序:94℃变性2min后，94℃30s、60℃40s、72℃50s进行35个循环，最后72℃延伸5min。采用2-△△Ct法比较低氧与常氧培养下基因表达情况。Oct4、Sox2、Nanog、成骨特异性转录因子（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、过氧化物增殖物活化受体γ2（peroxisome proliferator-activated receptorγ2，PPARγ2）、β-actin基因引物由Invitrogen（上海）贸易有限公司合成（表1）。