《表4 定量PCR引物序列Table 4 Primer sequences used for quantitative real-time PCR validation of gene express

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提取RNA后,采用Prime Script TM1ststrandc DNA Synthesis Kit(clone tech,USA)进行c DNA合成。q RT-PCR引物用Primer5.0软件设计,以UBC21(ubiquitinconjugating enzyme 21)作为内参基因(序列为:5'-CCTCTGCAGCCTCCTCAAGT (F),and 5'-CATA TCTCCCCTGTCTTGAAATGC(R)) ,采用两步循环法在CFX96TM Real-Time System(BIO-RAD,USA)中进行(Zhang et al.,2014)。另外,采用比较循环阈值法评价相关基因,以方差分析和事后检定法分析数据,p值<0.05为显著性差异,以下为引物序列(表4)。