《表3 Ch IP所需引物》

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《MKL1靶向CAAP1促进胃癌细胞的自噬并抑制凋亡》

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严格按照SimpleChIPEnzymatic Chromatin IP Kit（Agarose Beads）说明书用37%的甲醛溶液进行交联反应，预冷PBS漂洗2次，收集细胞，4℃、1 500r/min离心10 min，弃上清；收集的细胞用于细胞核处理和染色质剪切，其中用微球菌核酸酶将样品DNA消化成150～900 bp的片段4℃、13 000 r/min离心3 min沉淀细胞核，后对细胞核超声处理，4℃、10 000 r/min离心10 min，保留上清；染色质免疫沉淀时将样品分成3组，分别加入MKL1抗体、Ig G抗体、无抗体，4℃过夜，每组加入ChIP级蛋白G琼脂糖微珠孵育；将染色体从抗体/蛋白G微珠上洗脱并解交联，离心柱纯化DNA后进行PCR反应，2%的琼脂糖凝胶电泳分析实验结果。PCR过程所需引物如表3所示。