《表1 实时定量RT-PCR引物序列及产物长度》
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《心理应激诱导ROS产生在食管上皮细胞间隙增宽发生中的作用机制》
采用实时定量RT-PCR方法检测Nox-4、Nrf-2、HO-1、闭合蛋白-1(Claudin-1)、闭合蛋白-4(Claudin-4)、咬合蛋白(Occludin)及胞质紧密黏连蛋白-1(zonula occludens,ZO-1)mRNA的表达。取每只小鼠食管组织20mg,采用TRIzol试剂提取总RNA,采用天根公司Fast Quant RT试剂盒合成第一链cDNA。由上海生工生物工程股份有限公司设计并合成引物,各指标及β-肌动蛋白(actin)引物序列和扩增产物长度见表1。RT-PCR反应严格按照试剂盒操作说明进行。实时定量RT-PCR,反应体系为20μl,反应条件为94℃3min,然后95℃20s,60℃20s,72℃20s,共40循环。反应结束后由电脑自动得出荧光曲线及CT值,采用2—△△Ct计算出Stress组小鼠食管组织相对于Control组中目标基因的相对表达倍数。
图表编号 | XD0010323000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.01 |
作者 | 买买提·依斯热依力、吾布力卡斯木·吾拉木、李义亮、艾克拜尔·艾力、阿孜古丽·阿力木江、曹正一、阿布拉江·米吉提、蒋媛、赵新胜、克力木·阿不都热依木 |
绘制单位 | 新疆维吾尔自治区人民医院普外微创研究所、新疆维吾尔自治区人民医院微创、疝和腹壁外科、新疆医科大学研究生学院、新疆维吾尔自治区人民医院普外微创研究所、新疆维吾尔自治区人民医院微创、疝和腹壁外科、新疆维吾尔自治区人民医院普外微创研究所、新疆维吾尔自治区人民医院微创、疝和腹壁外科、新疆维吾尔自治区人民医院妇产科、新疆医科大学研究生学院、新疆医科大学研究生学院、新疆维吾尔自治区人民医院微创、疝和腹壁外科、新疆医科大学研究生学院、新疆维吾尔自治区人民医院普外微创研究所、新疆维吾尔自治区人民医院微创、疝和腹壁外科 |
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