《表1 引物序列:阿托伐他汀抑制动脉粥样硬化患者NLRP3炎性体途径的研究》
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《阿托伐他汀抑制动脉粥样硬化患者NLRP3炎性体途径的研究》
采用实时荧光定量PCR法。将MDM根据Trizol试剂盒说明书提取总RNA,加入20μl的焦碳酸二乙酯水溶解,测定RNA的浓度和OD比值,符合要求后按照SuperRT cDNA第一链合成试剂盒说明书进行逆转录反应,20μl反应体系中包括dNTP mix 4μl,SuperRT 1μl,5×RT Buffer 4μl,RNA 2μl,引物2μ1,DEPC水7μl,反应物4℃储存待用。实时荧光定量PCR根据参考文献进行,20μl反应体系中含SYBR Premix Ex TaqTMⅡ(2×)10μl,PCR上游和下游引物各1μl,逆转录反应液(cDNA溶液)2μl,DEPC水6μl,在定量PCR仪上进行反应,反应条件为95℃,30s;95℃,5s;60℃,34s,40个循环,每个样品设定3个复孔,并使用溶解曲线分析引物特异性。用2-ΔΔCt法计算出每组样本的mRNA表达量,每种检测重复3次。引物根据文献报道设计和合成,引物序列见表1。
图表编号 | XD0098865100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.09.10 |
作者 | 李奕萍、王红琴、王健、郑文华、陈建忠 |
绘制单位 | 淳安县第一人民医院检验科、淳安县第一人民医院检验科、淳安县第一人民医院检验科、淳安县第一人民医院检验科、浙江大学免疫学研究所 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |