《表1 FOXL2 4对引物各值比较》

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《已知位点突变检测中测序引物的规范化设计》

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注:-为此项无数据

经过上述操作，针对BRAF（V600E）基因，得到引物序列1对:3′-TCATAATGCTTGCTCTGAT-AGGA，5′-TTTCTAGTAACTCAGCAGCATCT。3′、5′端引物长度均为23bp，3′端Tm值为57.19，5′端Tm值为57.33，GC百分比均在39.15，没有发卡结构（Hairpin），二聚体（Dimer）ΔG值为-5.6，错配修复（False Priming）ΔG值为-9.5，引物二聚体（Cross Dimer）ΔG值为-5.0。各值均符合引物设计一般规则。针对FOXL2（C134W）基因，得到4对引物。4对引物各值均基本符合引物设计的一般规则，引物1相对于其他3对引物，无发卡结构及错配修复，引物二聚体及上下游引物之间的二聚体ΔG值较小（表1），故选取1号引物进行订购及验证。