《表1 引物序列表：除幽愈疡免煎颗粒对胃溃疡模型大鼠的实验研究》

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《除幽愈疡免煎颗粒对胃溃疡模型大鼠的实验研究》

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总RNA的提取（TRIzol法）:取50～100 mg组织放入小匀浆器中，置于冰上，加入1 mLTRIzol，匀浆，转入1.5 mL离心管中，室温静置5 min。加入0.2 mL氯仿，震荡15 s，静置2 min。4℃，12 000 r/min×10 min离心，弃上清。加入0.5 mL异丙醇（或与上清等体积），将管中液体轻轻混匀，静置10 min。4℃，12 000 r/min×10 min离心，弃上清。加入1 m L 75%乙醇，轻轻洗涤沉淀。4℃，7 500 r/min×5 min离心，弃上清，晾干，加入适量的DEPC H2O溶解（65℃促溶10～15 min）。以上步骤提取组织中的总RNA作为模板，采用Oligo（dt）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA，可为进一步扩增提供模板。PCR反应:荧光定量PCR反应体系:各cDNA样品分别用上述引物进行定量PCR反应，反应体系为20μL，每个样品设置3个重复。对RT产物进行荧光实时定量PCR，反应体系为:SYBR Green Master Mix 10μL，上游引物1μL，下游引物1μL，cDNA 1μL，补灭菌双蒸水7μL至20μL体系。荧光定量PCR反应条件:95℃预变性4 min，94℃变性15 s，60℃退火20 s，72℃延伸20 s并读取荧光值，45次循环，循环后设置55～90℃每隔0.3℃读荧光值生成熔解曲线。所有设定保存后运行程序。反应完成后，选择PCR base line substracted模式进行数据分析和修正。