《表1 烟粉虱钙结合蛋白的qRT-PCR引物》

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《MED烟粉虱钙结合蛋白的鉴定及表达分析》

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荧光定量PCR引物参照表1，荧光定量PCR反应体系:1μL cDNA，10μL 2×SuperReal PreMix Plus，0.4μL 50×ROX Reference Dye（TIANGEN，China），上下游引物各0.6μL，加ddH2O补足体系至20μL。荧光定量PCR反应程序为95℃预变性10 min，95℃变性15 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，40个循环（收集荧光信号）；选用EF-1α和RPL29作为内参基因。钙结合蛋白荧光检测均设置3次技术重复和3次生物学重复用于数据分析。依据各样品和其相对应的内参基因的Ct值，参照2–ΔΔCt方法进行分析。不同样本之间的差异采用SPSS19.0软件进行统计分析，以Duncan’s新复极差方法进行差异显著性检验。