《表1 抑菌实验的加药分组》

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《杜仲叶水提物对保加利亚乳杆菌抑菌活性的影响》

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以S.aureus为菌种，采用平板牛津杯法测定抑菌活性。将15 m L MRS固体培养基倾注于无菌平皿中，冷却后备用。在平皿中轻放无菌干燥的牛津杯，再将千分之一接种量，即10μL S.aureus菌液与40～50℃10 m L LB固体培养基混匀并倾注平皿中，待凝固后取出牛津杯，在每个孔中加药30μL，以灭菌水为阴性对照，0.4 mg·m L-1庆大霉素为阳性对照。于37℃恒温培养24 h，测定抑菌圈直径，每组平行操作3份。抑菌圈比较结果见图3，趋势比较结果见图4，加药分组见表1。孔1为接种量不同的L.bulgaricus，孔2A-G组为对应孔1基础上加入终浓度为5 mg·m L-1杜仲叶水提物（最适L.bulgaricus生长浓度），H组为对应孔1基础上加入与A～G组杜仲叶水提物等质量的培养基成分大豆蛋白胨0.0495 mg（每孔杜仲生药量0.15 mg，每孔提取物量0.0495 mg），孔3为5 mg·m L-1的单一药液。以A组为例，各孔加入物质的配制:孔1A为L.bulgaricus种子液2μL+MRS液体培养基28μL；孔2A为L.bulgaricus种子液2μL+MRS液体培养基25μL+50 mg·m L-1药液3μL（药液终浓度为5 mg·m L-1）；孔3A为5 mg·m L-1药液30μL。其中，1μL L.bulgaricus种子液相当于7.2×104CFU活菌数；浓度50、5 mg·m L-1的药液均用MRS液体培养基配制。结果显示:在5 mg·m L-1（最适L.bulgaricus生长浓度）杜仲叶水提物作用下，不同接种量L.bulgaricus对S.aureus的抑菌效果均强于单一L.bulgaricus。5 mg·m L-1的杜仲叶水提物在不添加L.bulgaricus时，对S.aureus无抑菌效果。当L.bulgaricus的接种量为4.8×106CFU·m L-1时，两者抑菌圈的直径差异有显著性（P<0.05）。说明低接菌量时，5 mg·m L-1杜仲叶水提物能发挥最佳促进L.bulgaricus生长的作用。当L.bulgaricus的接种量为2.4×107CFU·m L-1时，两者均达到峰值。说明在营养物质一定的情况下，L.bulgaricus接种量为2.4×107CFU·m L-1最有利于L.bulgaricus的生长，产生了较强的抑菌活性，由于5 mg·m L-1杜仲叶水提物对L.bulgaricus有促生长作用，使其产生最强的抑菌活性，分别强于单一菌液或药液。当L.bulgaricus的接种量在（6.0～6.48）×107CFU·m L-1时，两者抑菌圈直径差值基本恒定。说明5 mg·m L-1杜仲叶水提物对L.bulgaricus促生长作用趋于定值。当单一加入接种量7.2×107CFU·m L-1L.bulgaricus或7.2×107CFU·m L-1L.bulgaricus及杜仲提取物等质量的培养基成分（大豆蛋白胨）时对S.aureus的抑菌圈直径都小于加入5 mg·m L-1杜仲叶水提物及2.4×107CFU·m L-1接种量的L.bulgaricus的抑菌圈直径，说明杜仲叶水提物对L.bulgaricus的促生长作用强于营养物质大豆蛋白胨。当L.bulgaricus的接种量在（4.8～64.8）×106CFU·m L-1时，5 mg·m L-1杜仲叶水提物对L.bulgaricus的促生长作用能增强其对S.aureus的抑菌活性，其中，2.4×107CFU·m L-1接种量的L.bulgaricus对S.aureus的抑菌活性最强。