《表2 SSR标记信息:楸树SSR标记在滇楸中的可转移性与应用》

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《楸树SSR标记在滇楸中的可转移性与应用》


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CTAB法提取滇楸基因组DNA。根据南京林业大学与中国林科院林业所开发的13个楸树SSR位点信息[20](表2),由上北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司合成荧光引物(表2);SSR-PCR扩增的最适反应体系为25μL体系,12.5μL 2×Taq PCR mix(由北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司生产)、0.5μL正反引物(10μmol/L)、和1μL模板DNA,无菌去离子水(dd H2O)补齐。扩增反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸30 s,共35个循环;72℃完全延伸5 min,4℃保存。SSR-PCR扩增产物经由ABI3730全自动测序仪毛细管电泳检测鉴别,利用GeneMapper软件读取结果,记录每个位点的分子质量大小。