《表6 知母盐制前后对2型糖尿病小鼠肝组织及脂肪组织中PI3K,PEPCK,PGC1 m RNA表达的影响（±s,n=9)》

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《知母盐制前后化学成分含量及改善2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗作用的差异分析》

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取血后，颈椎脱臼法处死小鼠，解剖摘取肝脏、脂肪组织，用预冷的生理盐水清洗，滤纸吸干多余水分，置于液氮中快速冷冻后转移至-80℃冰箱中保存备用。取冻存的组织约30 mg，根据总RNA提取试剂盒说明书提取各组小鼠肝组织、脂肪组织中的总RNA。各指标引物序列为[11]PI3K：上游5'-CGGCGTGACATGTAGGCTCTCA-3'，下游5'-ACGGCCCGCACTGCAAGTTTGCCT-3'（146 bp）；PEPCK：上游5'-GGGCCGCTGGATGTCGGAAG-3'，下游5'-CCAATCTTGGCCAGCGGCGA-3'（132bp）；PGC1：上游5'-AGTGGTGTAGCGACCAATCG GA-3'，下游5'-AGGACCGCTAGCAAGTTTGCCT-3'(109 bp）；β-肌动蛋白（β-actin）：上游5'-AGGCCAACCGTGAAAAGATG-3'，下游5'-TGG CGTGAGGGAGAGCATAG-3'(185 bp），各引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。反转录及Real-time PCR按照试剂盒说明书操作，β-actin，PI3K，PEPCK反应条件设定为95℃预变性10 min；95℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸20 s（共40个循环）。PGC1反应条件为95℃预变性10 min；95℃变性30 s，56℃退火30 s，72℃延伸20 s（共40个循环）。反应总体系25μL。采用2-ΔΔCt相对定量法计算PI3K，PEPCK，PGC1的m RNA相对表达，结果见表6。由表6可知，与空白组相比，模型组小鼠肝组织及脂肪组织中PI3K，PEPCK，PGC1的m RNA表达均显著下调（P<0.01）；与模型组相比，生知母组、盐知母组小鼠肝组织及脂肪组织中PI3K，PGC1的m RNA表达明显上调（P<0.05），但PEPCK m RNA的表达则无明显变化；与生知母组相比，盐知母组小鼠肝组织及脂肪组织中PI3K，PGC1的m RNA表达均明显上调（P<0.05），提示盐知母优于生知母。