《表2 PCR反应引物：淡色库蚊自然种群沃尔巴克氏体感染致细胞质不亲和相关基因初探》

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《淡色库蚊自然种群沃尔巴克氏体感染致细胞质不亲和相关基因初探》

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每个自然种群淡色库蚊取雌蚊10只，单只蚊置于1.5 mL EP管中，采用酚氯仿法进行蚊基因组DNA抽提。以单蚊基因组DNA为模板同时进行4个PCR反应，以分别检测蚊是否感染沃尔巴克氏体（wF+wR），感染的沃尔巴克氏体属于A大组（wAF+wR）还是B大组的pip(wBpipF+wR）或cauB组（wBcauBF+wR）。PCR扩增总体积为50μL，含10×PCR Buffer 5.0μL、dNTP 4.0μL(2.5 mmol/L）、上下游引物各2.0μL(10μmol/L，引物序列见表2）、Taq酶0.5μL(5 U/μL，购自日本宝生物公司）、DNA模板1.0μL、ddH20 35.5μL。PCR反应条件为94℃预变性5 min；94℃变性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸1 min，共32个循环；最后72℃延伸7 min。PCR反应结束后，取10μL PCR产物应用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测（120 V，30 min）。